推 ksksks:聽我中央的同學說有儀器可用壓力擠破細胞取蛋白質的 09/21 13:09
推 storma:french press 09/22 17:24
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: jbking (我是吉米) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 如何將動物tissue均質化
時間: Sat Oct 1 12:19:00 2005
有幾種方法
1. 液態氮冷凍，再用杵跟臼擣碎
本人使用過此方法，homogenize的效果並不是很好，不推薦
2.使用均質機
均質機的擣碎效果不錯，速度快，但缺點就是每絞完一個sample必須要清洗一次
不然就是要準備好幾支均質機的頭。
3.使用玻璃grinder
這個方法是我們實驗室較長使用的，通常取適量的sample加上適量的extraction
buffer，再利用玻璃與玻璃間的摩擦達到磨碎tissue的效果。此法很簡單，grinder
也不貴(500-700 ntd/pair)，唯一缺點就是需要用到很多人力，如果您剛好要homogenize
herat，那真的得磨上一陣子
不過我比較推薦此法，便宜，簡單，效果好
--
p.s 剛剛看到推文，有人推說用french press....
如果我要擣碎小鼠的肺和心臟，請教我怎麼用好不好....
--
: > 因為實驗室將要取老鼠的內臟來做protein extraction
: > 我找到許多的protocol
: > 但是我覺得很疑惑的是 要如何將細胞均質化
: > 我現在想到的是要用均質機
: > 但是我不知道有沒有其他更簡便的方法呢
--
諸法皆空 自由自在
願主保佑你們~~~ ꌊ
~~阿門~~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.94.37
※ 編輯: jbking 來自: 140.116.94.37 (10/01 12:23)
推 ostine:第一個方法，可以再配上extraction buffer，效果也不錯 11/12 03:26
→ ostine:只是tissue一多，手就會磨到斷掉，應該是裡面最省錢的方式ꐠ 11/12 03:27
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: prrtty (somewhere i want to...) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 如何將動物tissue均質化
時間: Tue Feb 28 14:36:47 2006
均值機本身可以控溫嗎? 如果想要在四度C下操作怎麼辦?
※ 引述《jbking (我是吉米)》之銘言：
: 有幾種方法
: 1. 液態氮冷凍，再用杵跟臼擣碎
: 本人使用過此方法，homogenize的效果並不是很好，不推薦
: 2.使用均質機
: 均質機的擣碎效果不錯，速度快，但缺點就是每絞完一個sample必須要清洗一次
: 不然就是要準備好幾支均質機的頭。
: 3.使用玻璃grinder
: 這個方法是我們實驗室較長使用的，通常取適量的sample加上適量的extraction
: buffer，再利用玻璃與玻璃間的摩擦達到磨碎tissue的效果。此法很簡單，grinder
: 也不貴(500-700 ntd/pair)，唯一缺點就是需要用到很多人力，如果您剛好要homogenize
: herat，那真的得磨上一陣子
: 不過我比較推薦此法，便宜，簡單，效果好
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.167.161.241
推 ptthamutaro:tissue放管內,管子旁邊放冰塊? 不要連續磨? 02/28 15:37
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: [email protected] (髒小雞......), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 如何將動物tissue均質化
發信站: Perl (Tue Feb 28 16:40:59 2006)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!Perl
※ 引述《[email protected] (somewhere i want to...)》之銘言：
: 均值機本身可以控溫嗎? 如果想要在四度C下操作怎麼辦?
在你裝sample的容器下
再放一個燒杯裝冰塊就可以了
: ※ 引述《jbking (我是吉米)》之銘言：
: : 有幾種方法
: : 1. 液態氮冷凍，再用杵跟臼擣碎
: : 本人使用過此方法，homogenize的效果並不是很好，不推薦
: : 2.使用均質機
: : 均質機的擣碎效果不錯，速度快，但缺點就是每絞完一個sample必須要清洗一次
: : 不然就是要準備好幾支均質機的頭。
: : 3.使用玻璃grinder
: : 這個方法是我們實驗室較長使用的，通常取適量的sample加上適量的extraction
: : buffer，再利用玻璃與玻璃間的摩擦達到磨碎tissue的效果。此法很簡單，grinder
: : 也不貴(500-700 ntd/pair)，唯一缺點就是需要用到很多人力，如果您剛好要homogenize
: : herat，那真的得磨上一陣子
: : 不過我比較推薦此法，便宜，簡單，效果好
--
║ ╭╦╦╦╯╭ ╰╮
║║║ ╭══╯ ╯═╦═
╭╯║╰╮ ╰══╯ ║═╬═
╭═╯ ║ ╰═╮ ╰══╣ ║═╬═
╯ ╮║ ╰ ══╬══║ ║
╰╝ ╰═╯═╯╯═╩═
--
╦═╮ Origin:
╬═╯ 作者來自 59-115-197-152.dynamic.hinet.net
╩ｅｒｌ 蔚藍海岸 perl.tcu.edu.tw (203.64.80.217)
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: [email protected] (有減跟沒減一樣耶), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 如何將動物tissue均質化
發信站: 新綠園 (Tue Feb 28 20:34:50 2006)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!ncyusa
※ 引述《[email protected] (髒小雞......)》之銘言：
> ※ 引述《[email protected] (somewhere i want to...)》之銘言：
> : 均值機本身可以控溫嗎? 如果想要在四度C下操作怎麼辦?
> 在你裝sample的容器下
> 再放一個燒杯裝冰塊就可以了
如果不夠高 在燒杯下墊個箱子
比如說 宅急便時裝酵素那種寶麗龍箱子
應該就Ok了
--
生命 就該浪費在美好的食物上...
--
╭─ Origin ─╗ 新綠園 bbs.sa.ncyu.edu.tw ～ κλμ ─┤
├ Author ╡ 61-223-207-200.dynamic.hinet.net
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: CErline (自體螢光好強…) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 如何將動物tissue均質化
時間: Thu Mar 2 19:35:20 2006
※ 引述《jbking (我是吉米)》之銘言：
: 有幾種方法
: 1. 液態氮冷凍，再用杵跟臼擣碎
: 本人使用過此方法，homogenize的效果並不是很好，不推薦
: 2.使用均質機
: 均質機的擣碎效果不錯，速度快，但缺點就是每絞完一個sample必須要清洗一次
: 不然就是要準備好幾支均質機的頭。
: 3.使用玻璃grinder
: 這個方法是我們實驗室較長使用的，通常取適量的sample加上適量的extraction
: buffer，再利用玻璃與玻璃間的摩擦達到磨碎tissue的效果。此法很簡單，grinder
: 也不貴(500-700 ntd/pair)，唯一缺點就是需要用到很多人力，如果您剛好要homogenize
: herat，那真的得磨上一陣子
: 不過我比較推薦此法，便宜，簡單，效果好
補充一個方法，有人發明把生物樣本放進管子裡，然後用高低壓循環的方式
把細胞或組織擠碎，因為壓力高軟硬組織蛋白質DNA都可以，整個過程只要
3分鐘，我覺得這個方法滿好控制條件的，不然以前在磨細胞，今天磨和明天
磨的時間和次數都很難一樣，因為我是要看蛋白質表現的，磨的不夠就不均
勻，時間久一點還怕 degrade掉，跑2D的的結果很難讓自己可以相信……
國外的網址：http://www.pressurebiosciences.com/
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.160.49.225
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: [email protected] (有減跟沒減一樣耶), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 如何將動物tissue均質化
發信站: 新綠園 (Thu Mar 2 19:57:42 2006)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!ncyusa
※ 引述《[email protected] (自體螢光好強…)》之銘言：
> ※ 引述《jbking (我是吉米)》之銘言：
> : 有幾種方法
> : 1. 液態氮冷凍，再用杵跟臼擣碎
> : 本人使用過此方法，homogenize的效果並不是很好，不推薦
> : 2.使用均質機
> : 均質機的擣碎效果不錯，速度快，但缺點就是每絞完一個sample必須要清洗一次
> : 不然就是要準備好幾支均質機的頭。
> : 3.使用玻璃grinder
> : 這個方法是我們實驗室較長使用的，通常取適量的sample加上適量的extraction
> : buffer，再利用玻璃與玻璃間的摩擦達到磨碎tissue的效果。此法很簡單，grinder
> : 也不貴(500-700 ntd/pair)，唯一缺點就是需要用到很多人力，如果您剛好要homogenize
> : herat，那真的得磨上一陣子
> : 不過我比較推薦此法，便宜，簡單，效果好
> 補充一個方法，有人發明把生物樣本放進管子裡，然後用高低壓循環的方式
所以是針筒囉?
以前實驗課用過耶
一直抽吸抽吸
細胞膜就因為壓力差破掉了
這樣抽蛋白質還不賴ㄟ
> 把細胞或組織擠碎，因為壓力高軟硬組織蛋白質DNA都可以，整個過程只要
> 3分鐘，我覺得這個方法滿好控制條件的，不然以前在磨細胞，今天磨和明天
> 磨的時間和次數都很難一樣，因為我是要看蛋白質表現的，磨的不夠就不均
> 勻，時間久一點還怕 degrade掉，跑2D的的結果很難讓自己可以相信……
> 國外的網址：http://www.pressurebiosciences.com/
--
生命 就該浪費在美好的食物上...
--
╭─ Origin ─╗ 新綠園 bbs.sa.ncyu.edu.tw ～ κλμ ─┤
├ Author ╡ 218-171-55-33.dynamic.hinet.net
推 CErline:不是針筒，針筒不能抽硬組織，不夠力 03/02 22:09