我買的抗體的用使用說明書上 健議的使用量是 1ug/ml(做western)
而 它來的包裝是100ug..
而我的問題是
1.它 沒有告訴我說 那罐的體積是多少?我猜是 100ul拉..(不知這是正確的嗎/)
我買的parmigen的 是BD的..
2.基於這樣..我就 泡10CC 的TBST 加入 10ul的 抗體 也就是1:1000的方試..
但世這是建立於 那灌的抗體是 100ul 中 有100ug..的 對吧??
3.當我覺的 一個蛋白很難表現的時候 如 當我lo 50ug/ml 的表現沒有很明顯..
所以 是否我可以lo 100ug/ml來 改善這現像呢?我是 hy p21 蛋白..
當我在呈色的時候 我都傻眼了....= =" 根本就像沒表現 頭好痛喔...
可否請 各位大大 幫幫忙 ...謝謝...
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標題 Re: [問題] 請問抗體問題?
時間 陽明大學神農坡資訊站 (Sat Dec 25 22:59:24 2004)
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考慮是否先做IP(immunoprecipitation)
看看有無此protein expression
及抓ab最適比例
試完再不行
看看是否是ECL的問題
ECL plus及ECL advance(安法嗎西亞或其他公司的也可以)
是做微量protein expresstion用喔!
試試吧~
PS.我用過B.D.的ab個人印象不大好
現在大廠太多代工廠QC有問題~
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