推 keku:怎麼沒把TIRFM算進去? ^^ 140.109.214.254 11/16
推 vmp:TIRF嗎?我覺得應用上不太一樣，多收集一些 220.130.132.190 11/16
→ vmp:資料再來po 220.130.132.190 11/16
※ 引述《keku (月光下輕舞)》之銘言：
: : 前一陣子 不斷的一抗二抗泡 才增加點靈敏度 但這應該不是辦法..-_-;;
: 提高訊雜比或噪訊比(Signal to Noise ratio)是很tricky的問題
: 螢光顯微術在硬體上、軟體上有些方法可以做enhance 在此先不贅述
在硬體上，最為大家所熟知的工具，就是Confocal，
Confocal的基本原理，大家應該略有耳聞，
這裡就先跳過這項工具。
要提到用軟硬體改善螢光的呈現，
就要先提到光的特性。
請大家想像一下，當一個「點」發光時，
除了中心最亮的一點之外，在點的Y方向，會呈現上下兩個漏斗狀
\./
/ \ 大概像這樣......=.=
在立體當中，有很多這樣的漏斗狀太接近，或互相重疊下，
就會在螢光顯微鏡中看到「一坨」亮亮霧霧的螢光。
這在一般螢光顯微鏡中是無法避免的。（不然也不用去用confocal啦~）
光點會呈現上下漏斗這樣的特性，
可以用一個叫作PSF（point spread function)函數來作運算。
這樣的運算工具，在很多生物影像分析軟體中都有，
這個功能叫作「3D deconvelusion」
例如Metamorph、IPP（image pro plus)
或是在各單位採買的顯微鏡附屬軟體中都可以找到這樣的功能。
（不過這個功能都是要加錢才能買到）
大家有興趣的話，可以參考下列網站：
MetaMorph
http://www.image1.com/products/metamorph/
IPP（Image-Pro plus）
http://www.mediacy.com/ipp/imageproplus.htm
Zeiss
http://0rz.net/8002Y
Leica
http://www.leica-microsystems.com/website/lms.nsf
講這麼多，不如讓大家看一下，經過3D deconvolusion運算的結果：
http://www.image1.com/products/apps/3ddecon.cfm
不過經過軟體內寫好的公式運算的結果，還是有那麼一點讓人不放心，
再說，同一套軟體內，就可能同時存在兩種以上不同的運算公式，
套用不同的公式時，可能還有實驗設計或記錄上問題。
如果能從硬體上做出影像澄清的效果，
還是比較直接爽快。
不過目前能從硬體上做出這樣效果的，
除掉confocal不說，
大概只有Spinning disc和Apotome
Spinning Disc(PerkinElmer）：
http://www.uib.no/med/mic/equipment/UltraView-RS/UltraView-RS.html
Apotome原理：（點選網頁右側其他連結，可看Apotome處理結果）
http://0rz.net/4e02T
有利用到Apotome工具的已發表paper（找一篇大家都可以免費閱讀的）
http://www.biomedcentral.com/1471-2121/5/31
另外，清大江安世老師研發出的FocusClear藥品，
好像也有使影像澄清的作用，
這部分並沒有深入找資料啦~
http://magazines.sina.com.tw/bioera/contents/200405/200405-001_7.html
（只看了這個）
希望有用過FocusClear的同學們，能聊一下啦~
用法、使用範圍、心得.....還滿想知道這個藥品在市面上銷售和使用情形。
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