推 kitiara:pET system是需要 IPTG induce才會生產 Protein 12/05 13:34
→ kitiara:你抽不出來應該跟作蛋白無關 12/05 13:35
→ elgase:你transform完有先跑colony PCR嗎? 12/05 19:58
→ elgase:如果沒有,建議你用sepcpfic primer跑PCR確認有沒有insert 12/05 20:00
大家好...
最近在做cloning的時候不是很順...
vector：pET-21b
好不容易ligation-transformation後長出colony
但是搖5ml菌液抽plasmid結果確是空的...
不知道大家有沒有類似的經驗....
有可能是大部分的能量都拿去做蛋白了...質體複製的少...
不過我有去測濃度...每ul還有20ng...這就蠻怪的...
想請教大家..在做這些蛋白表現的construction有什麼要特別注意的...
謝謝大家囉 ^_^
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