[求救] pET32 vector的使用

[mournermind (阿矇)]

因為實在沒什麼頭緒想請有經驗的各位提供個想法

我現在要的蛋白接在pET32b中 想要利用它的trx來增加我蛋白的可溶性

表現後的確本來幾乎不可溶的蛋白(以前學姐做)變的是有部份可溶了

我現在想利用純化soluable protein的方式來純化出我要的蛋白

再將trx切掉得到較完整的我要的蛋白 但是由於以酵素切掉trx後

His後所得到的proein帶有His tag而被切掉的trx上也帶有His tag

所以想問有經驗的學長姊們遇到這問題可以怎麼做呢?

我應該可以如何來將這兩個都帶有his的蛋白分開來咧@@?

真的是很想知道應該怎麼做 有辦法的人請給我一些指點 orz

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◆ From: 140.113.173.5
推 diskitty:Gel filtration?
推 zytase:嗯~我也想到用gel filtration去分,不知道這兩個蛋白分子量?
推 ATKINS:Q