作者cloud74115 (阿亮)
看板Biotech
標題[問題] pET expression vector的選定
時間Tue Mar 7 19:00:17 2006
之前將我的insert接到pGEX4T1這個vector
定完序列也送到BL21作表現蛋白質
同時也有做空pGEX4T1做control
可是做了很久
一直沒有看到我的fusion protein有被表現出來
但是空的pGEX4T1卻明顯有出來
和老師討論過後 老師也不知道為什麼會這樣
所以後來決定要換套系統是看看
現在想要看pET哪個vector最適合
將insert這個protein純化出來後
目的要做in vitro binding assay
另外我的蛋白質是膜蛋白
大概是1.6 bp
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.174.98
推 aggaci:連Western blot也看不到嗎? 03/07 20:54
推 enisx:induction的條件是如何?? 我有遇過這種情形 那時候是重新做 03/07 22:49
→ enisx:一次 因為 要來的pGEX似乎有問題 03/07 22:51
推 hkaiwei:會不會是protein沉澱了 03/07 23:09
推 ROKEE:case by case la.....我的一個蛋白構了8種表現載體 /_\~ 03/07 23:48