對不起我是新手
不知道哪裡有相關文章
就是我知道PCR的原理
不過我常常會聽到"p 一個retriction site"這句話
我想請問pcr不就是把目標基因放大嗎
怎麼可以改變它的鹼基對呢?
希望有大大可以點一下
不然給我網址 參考書目也可以
感激不盡@@
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◆ From: 140.123.10.107
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作者 blence ( ) 看板 Biotech
標題 Re: 想請問一個PCR的基本原理
時間 Thu Nov 25 19:27:41 2004
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※ 引述《popoyellow ()》之銘言：
: 對不起我是新手
: 不知道哪裡有相關文章
: 就是我知道PCR的原理
: 不過我常常會聽到"p 一個retriction site"這句話
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如果你沒有交代你是在什麼場合或對象聽到的
可能很難瞭解你在說什麼
比如操作PCR-RFLP時，把某個polymorphism所在的sequence放大
或者clone時，為了方便PCR的產物接上合適的vector
都有人會像你那麼說
: 就是我知道PCR的原理
: 不過我常常會聽到"p 一個retriction site"這句話
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如果你沒有交代你是在什麼場合或對象聽到的
可能很難瞭解你在說什麼
比如操作PCR-RFLP時，把某個polymorphism所在的sequence放大
或者clone時，為了方便PCR的產物接上合適的vector
都有人會像你那麼說
: 我想請問pcr不就是把目標基因放大嗎
: 怎麼可以改變它的鹼基對呢?
當然可以，端看你的實驗需求
你可能需要把該段產物的sequence作任何修改
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◆ From: 61.31.145.245
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作者 tracy9102 (舞飛櫻) 看板 Biotech
標題 Re: 想請問一個PCR的基本原理
時間 Thu Nov 25 20:10:45 2004
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※ 引述《popoyellow ()》之銘言：
: 對不起我是新手
: 不知道哪裡有相關文章
: 就是我知道PCR的原理
: 不過我常常會聽到"p 一個retriction site"這句話
: 我想請問pcr不就是把目標基因放大嗎
: 怎麼可以改變它的鹼基對呢?
: 希望有大大可以點一下
: 不然給我網址 參考書目也可以
: 感激不盡@@
PCR是可以改變鹼基對的喔~~
尤其像我的實驗是做CLONE的
常常為了要接上某個特定vector而必須要改變幾個base
這時候可以利用設計過的primer
和比較低的溫度去進行
假設原本的序列是 TCTA GGCACC ATG....
ATG後面是我們要的基因
但前面需要有個限制酵素切位
才能接上vector
於是我的引子可以設計成 TCTA(幫助黏上的相序列列)
GGATCC ATG.....(大約50個mer)
^^^^^^
只把這邊改成我想要的切位
其餘都一樣
就可以P出酵素切位嚕 ^^
提供參考~這是我論文的一部分呢~
不過這引子
是我們老師設計的
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◆ From: 61.64.4.23
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作者 Chester (失去就是擁有) 看板 Biotech
標題 Re: 想請問一個PCR的基本原理
時間 Thu Nov 25 23:12:32 2004
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http://juang.bst.ntu.edu.tw/BCX/files.htm#王愛玉
(後面的中文要接上喔)
這是生技系生化實驗講義...
去找"以聚合脢連鎖反應增殖 DNA"這份講義 裡頭有講到一些基本原理..
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◆ From: 140.112.193.157