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※ [本文轉錄自 Biology 看板] 發信人: joannechen.bbs@bbs.csie.nctu.edu.tw (joanne), 看板: Biology 標 題: 請問PCR為什麼會smealing 發信站: 交大資工鳳凰城資訊站 (Sun Jan 23 21:24:41 2005) 轉信站: SimFarm!zoonews.ee.ntu!bbs.ee.ntu!news.ntu!mars.scc.ntnu!ctu-peer!news 想請問一下之前我做PCR的時候有成功 後來不管在怎麼做他都會smealing 不知道是哪裡出了問題 我有看書說PCR的反應cycle通常在25-35cycle 我使用的pimer文獻是提供50cycle是不是因為cycle數過高 但是很奇怪明明用這個反應條件就有成功過 還有到後來我的blank還有postive control(純的DNA)也會smealing 後來也嘗試降低cycle還是會smealing 這樣到底哪裡出了問題呢 可以幫忙解答一下嗎 謝謝各位 -- ※ Origin: 交大資工鳳凰城資訊站 <bbs.csie.nctu.edu.tw> ◆ From: 140.135.121.152
ccfccf:smear... 163.15.161.234 01/26
> --------------------------------------------------------------------------- < 作者 dreamcity.bbs@bbs.badcow.com.tw (~飛向無限的未知世界 看板 Biotech 標題 Re: [轉錄]請問PCR為什麼會smealing 時間 不良牛牧場 (Mon Jan 24 23:41:00 2005) 轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost ─────────────────────────────────────── 藥劑或是酵素被污染?換一套試試看吧. -- 對的時間,遇見對的人,是一生幸福; 對的時間,遇見錯的人,是一場心傷; 錯的時間,遇見錯的人,是一段荒唐; 錯的時間,遇見對的人,是一生嘆息. -- ╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ Welcome to SimFarm BBS -- From : [202.39.44.16] ◣◣◢ ◢◢不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo ◣◣─╯ > --------------------------------------------------------------------------- < 作者 ubiquitin.bbs@nculs.twbbs.org.tw (goodday), 看板 Biotech 標題 Re: [轉錄]請問PCR為什麼會smealing 時間 生生不息 (Wed Jan 26 11:11:02 2005) 轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost ─────────────────────────────────────── smeal.... 是不是有拼錯字 你指的是有雜band 還是糊成一鴕? 我會去提高 anneal 的溫度提高 primer 的專一性 DNA很穩定 不會隨便斷的 -- Origin: 中央生科˙生生不息 nculs.twbbs.org.tw Author: ubiquitin 61-218-73-116.HINET-IP.hinet.net 發表 > --------------------------------------------------------------------------- < 作者 koala1012.bbs@bbs.Life.NCTU.edu.tw ( 耶豆 ), 看板 Biotech 標題 Re: [轉錄]請問PCR為什麼會smealing 時間 交大生科勁公園 (Wed Jan 26 12:24:07 2005) 轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost ─────────────────────────────────────── : smeal.... 是不是有拼錯字 : 你指的是有雜band 還是糊成一鴕? : 我會去提高 anneal 的溫度提高 primer 的專一性 : DNA很穩定 不會隨便斷的 那會不會有不太糊成一駝 約略是一個band 但是跟預期的片段大小有小一點的情形 -- ※Post by koala1012 from 140.113.140.92