想請問一下有經驗的前輩們
在做cloning時抽E coli的plasmid會加入RNaseA
這一個步驟是否必要
因為實驗室裡有在抽RNA....被禁止使用RNase
有沒有前輩可以給個意見...
--
※ Post by axin from c13.tr11.kmu.edu.tw ...
--
＊Origin: ω熱帶魚天堂ω tropic.med.kmu.edu.tw
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: ssuny (黑夜中的黑貓) 看板: Biotech
標題: Re: 【問題】抽plasmid
時間: Mon Jun 13 19:44:39 2005
※ 引述《YuChHa (尋找內心的平靜)》之銘言：
: ※ 引述《axin.bbs@tropic.med.kmu.edu.tw (悶)》之銘言：
: : 想請問一下有經驗的前輩們
: : 在做cloning時抽E coli的plasmid會加入RNaseA
: : 這一個步驟是否必要
: 沒必要
: 看你要不要去除RNA而已
: Depend on your exp.
: : 因為實驗室裡有在抽RNA....被禁止使用RNase
: : 有沒有前輩可以給個意見...
: 你要抽RNA
: 你還加RNaseA?? >_____<"
其實是要看你要的band的大小決定
不然你要的band跟RNA混在一起
你怎麼知道裡面有沒有你要的東西
基本上...如果要用RNase...
就挑沒有再抽RNA的時候做吧
不過話說我抽過幾次...也沒被污染過說..
照抽不誤XD
--
我的暗黑圖片收藏
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=suny&book=4
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 220.134.112.28
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: ROKEE.bbs@bbs.badcow.com.tw (死胖子超怕熱), 看板: Biotech
標 題: Re: 【問題】抽plasmid
發信站: 不良牛牧場 (Mon Jun 13 23:33:40 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!SimFarm
※ 引述《axin.bbs@tropic.med.kmu.edu.tw (悶)》之銘言：
: 想請問一下有經驗的前輩們
: 在做cloning時抽E coli的plasmid會加入RNaseA
: 這一個步驟是否必要
: 因為實驗室裡有在抽RNA....被禁止使用RNase
: 有沒有前輩可以給個意見...
看片段大小吧
一般如果沒有RNase treat的話大概400 bp以下都是整片亮的!
不然就是菌不要養太老，E. coli大概8hr就收了
這樣就算不RNase treat也不會看到太多tRNA
--
有些實驗室為了省錢，還直接把RNase加在EtBr染盆裡咧...
畢竟泡成10ml(10mg/ml)的RNaseA就要8000元阿阿阿阿阿阿 :~~~~
--
╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮
│ ↘ Welcome to SimFarm BBS -- From : [140.120.213.101] │
╰◣◣◢ ◢◢《不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo》 ◣◣◢ ─╯