我一直很想不懂
1.每一種細菌都有質體，那質體當成vector接了外來的DNA片段後，如果要再
Transformation到細菌細胞內，會不會有專一性的限制呢？比方說 Ecoli的pBR322質體
是不是只能在Ecoli本身內才能進行複製？
我會有這個問題是因為在課本上看到了 shuttle vector這個名詞......
2.還有就是，文獻上都說，一個能夠當成vector的plasmid，一定會具有一個或多個
selectable marker ，用來到時候辨別哪些host cell有攝取recombinant DNA...
那現在假設一個情況：
假設先從A菌中萃取出了帶有”對抗”抗生素B基因的質體C，然後再加了一段foregin
DNA到C上，形成了Recombinant DNA ；之後就要把這段重組DNA transform 到A菌細胞
內，然後再把A菌放到有抗生素B的培養基內，但這時候要開始辨別哪些A菌有攝入重組
DNA時，不就出現了一個矛盾的狀況：含有重組DNA的A菌固然可存活，但就算沒有攝入
重組DNA的A菌，它本身細胞內不是就有C可以對抗B，所以也可以存活............
既然這樣，那還要怎麼分呢?????......@@""
麻煩好心人士指點一下，感激不盡....orz
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甲:何謂三生不幸?
乙:生理 生統 生化都當了
甲:請問師承何派?
乙:在下乃五當派 每考必當五科
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作者 blence ( ) 看板 Biotech
標題 Re: [問題] 有一些刁鑽的問題....
時間 Sun Nov 28 14:10:16 2004
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※ 引述《kgold50 (k金50)》之銘言：
: 我一直很想不懂
: 1.每一種細菌都有質體，那質體當成vector接了外來的DNA片段後，如果要再
: Transformation到細菌細胞內，會不會有專一性的限制呢？比方說 Ecoli的pBR322質體
: 是不是只能在Ecoli本身內才能進行複製？
: 我會有這個問題是因為在課本上看到了 shuttle vector這個名詞......
最可想而知的方式
就是plasmid在host內的複製與否
完全要靠host有沒有辦法辨識plasmid上的ori
: 假設先從A菌中萃取出了帶有”對抗”抗生素B基因的質體C，然後再加了一段foregin
: DNA到C上，形成了Recombinant DNA ；之後就要把這段重組DNA transform 到A菌細胞
: 內，然後再把A菌放到有抗生素B的培養基內，但這時候要開始辨別哪些A菌有攝入重組
: DNA時，不就出現了一個矛盾的狀況：含有重組DNA的A菌固然可存活，但就算沒有攝入
: 重組DNA的A菌，它本身細胞內不是就有C可以對抗B，所以也可以存活............
: 既然這樣，那還要怎麼分呢?????......@@""
: 麻煩好心人士指點一下，感激不盡....orz
看起來你還沒做過cloning相關的實驗？
你不可以把從A菌上面的C+f質體送到A菌內
而是應該送到A菌的competent cells或其他菌的competent cells內
至於什麼是competent cells？
如果你不知道的話翻翻前文有competent cells的製作方式
在google也可以找到其製作方式
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