(請益)將plasmid電入細菌內

請問有人做過類似的實驗嗎!?

我試圖將plasmid電入 E.coli.內

不過因為沒有實驗步驟

所以想詢問有沒有人有這方面的步驟

還有...

關於2mm 和4mm的管子有什麼差別嗎!?

謝謝    @?@
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夫兵者不祥之器物或惡之故有道者不處君子居則貴左用兵則貴右兵者不祥之器非君子
之器不得已BLOG http://www.wretch.cc/blog 安西教練 我想寫日記 嗚嗚o志於天下
矣吉事尚左凶事尚右偏將軍居左上將軍居右言以喪禮處之殺人之眾以哀悲泣之戰勝以
喪禮處之道常無名樸雖小天下莫能臣侯王若能守之萬物將自賓天地相合以降甘露民莫
之令而自均始制有名名亦既有夫亦將知59-105-47-247.adsl.dynamic.seed.net.tw海
推 wensing:www.google.com.tw  Key: e. coli
→ wensing:、transformation
推 wensing:electrotransformation、Biorad 165-2100
→ wensing:electroporation
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 作者  wensing (煉金術：等價交換    )                    看板  Biotech     
 標題  Re: (請益)將plasmid電入細菌內                                          
 時間  Wed Feb  2 22:36:02 2005                                               
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※ 引述《[e-mail] ()》之銘言：
: 請問有人做過類似的實驗嗎!?
: 我試圖將plasmid電入 E.coli.內
: 不過因為沒有實驗步驟
: 所以想詢問有沒有人有這方面的步驟
: 還有...
: 關於2mm 和4mm的管子有什麼差別嗎!?
: 謝謝    @?@

    兩者的電壓、時間不相同，但都可以用。
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    wensing (ptt) = eular (kkcity)

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 203.70.6.252
推 hjhao:原則上,電菌應用1mm或2mm的管子
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 作者  ad1980 (DREAMCHASER)                                 看板  Biotech     
 標題  Re: (請益)將plasmid電入細菌內                                          
 時間  Thu Feb  3 12:37:23 2005                                               
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※ 引述《[e-mail] ()》之銘言：
: 請問有人做過類似的實驗嗎!?
: 我試圖將plasmid電入 E.coli.內
: 不過因為沒有實驗步驟
: 所以想詢問有沒有人有這方面的步驟

跟平常的 transformation 差不多，
加 DNA... on ice for 5 mins...
拿去電，加 LB or SOC for recovery...
37C for 30 min...spread on plates...

主要不同是你要用 electrocompetent cells..
DNA 可能需要處理過...
然後 electroporation 的時候動作要快。
大致是這樣子....
                     
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