作者aggaci (有氣質的台客)
看板Biotech
標題Re: [問題] 請教關於RT-PCR的幾個問題
時間Tue May 23 00:57:24 2006
※ 引述《littlebu (LittleBU)》之銘言:
: 1. 我看Promega Oligo-dT的說明上寫它是18個T的Primer
: 請問這種Oligo-dT跟自己請廠商合成18個T會有什麼差異?
: 會比較好用?還是沒什麼差?
沒差,我都請生工合oligo-dT
: 請問有LAB是請廠商合成18個T來用嗎?
: 2. 請問抽完RNA後的吸光值質量都不錯,結果轉出cDNA沒有成功
: 這樣是代表mRNA佔的比例太少?還是mRNA被破壞?還是其他可能原因?
: 因為還沒有跑RNA GEL,所以都只能猜測
我猜是degradation或是你某種成分沒加到,或沒表現
: 3. 請問一般實驗室轉cDNA是取多少量的RNA? 我們是 2ug -> 20ul cDNA
: 請大家指點迷津,謝謝 TT
跟你差不多(我是total RNA)
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◆ From: 140.114.100.165
※ 編輯: aggaci 來自: 140.114.100.165 (05/23 00:59)
→ littlebu:我也是total RNA 2ug, 另外我是測GAPDH, 應該是有表現 05/23 14:28
→ littlebu:我也以為沒加到,再做一次還是一樣...被嫌很討債... 05/23 14:30
→ littlebu:謝謝你的熱心回答~ 05/23 14:31