[問題]請問有親身操作EMSA的人

[Elvis5 (After Dark)]

想請問在製作probe方面的問題

1.所合成的 oligonucleotide powder習慣會用MQ去溶成怎樣的濃度

例       310.08ug
      --------------
        6887.5 g/mol
   ---------------------- =  ? (pmol/uL)
          MQ  ? uL

2. annealing reaction

        forward oligonucleotide       ? uL
        reverse oligonucleotide       ? uL
        10 X  kination buffer         ? uL
        sterile MQ                    ? uL
  --------------------------------------------
                       final volume   ? uL

3. annealing cycling program

             95度C ?min --> ?????????????? --> 4度C

4. N-labeling

    dsDNA                     ? uL
    T4 polynucleotide kinase  ? uL
    10 X T4 PNK buffer        ? uL
    [r-32P]ATP                ? uL
    sterile MQ                ? uL
----------------------------------------------------
         final volume         ? uL


5. PCR cycling program

      ??????????????????????????????????????


可否給點建議 선  還有經驗分享   謝謝

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作者: pcboy (妞) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]請問有親身操作EMSA的人
時間: Fri Mar  4 05:39:31 2005

我會稀釋成5pmol保存
最後雙股是1pmol使用
嗯～EMSA的資訊非常的多
建議你可以先用網路搜尋一下哦


※ 引述《Elvis5 (After Dark)》之銘言：
: 想請問在製作probe方面的問題
: 1.所合成的 oligonucleotide powder習慣會用MQ去溶成怎樣的濃度
: 可否給點建議 선  還有經驗分享   謝謝

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推 Elvis5:謝謝
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發信人: [email protected] (none), 看板: Biotech
標  題: Re: [問題]請問有親身操作EMSA的人
發信站: 批踢踢參 (Fri Mar  4 07:41:53 2005)
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※ 引述《[email protected] (妞)》之銘言：
: 我會稀釋成5pmol保存
: 最後雙股是1pmol使用
: 嗯～EMSA的資訊非常的多
: 建議你可以先用網路搜尋一下哦
: ※ 引述《Elvis5 (After Dark)》之銘言：
: : 想請問在製作probe方面的問題
: : 1.所合成的 oligonucleotide powder習慣會用MQ去溶成怎樣的濃度
: : 可否給點建議 선  還有經驗分享   謝謝

我是10pmol保存
1pmol使用
依照lab習慣

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→ Elvis5:謝謝