有人在用overlap pcr做cloning嗎
我現在正在試overlap pcr 我是連接三段DNA fragment
用的select marker是NAT 要去破壞TUP1的基因
可是我試了好多次 就是無法把這三段連接起來
有沒有人家裡是做這個的 我是說OVERLAP PCR這方法
有成功的高手 可以分享一下你的操作經驗嗎 謝謝
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不管是聯考分數高到讓人羨慕的 還是大學可以拿到書卷的人
他們不一定都是班上最聰明的那一群
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發信人: [email protected] (goodday), 看板: Biotech
標 題: Re: [方法] overlap pcr
發信站: 生生不息 (Thu Sep 8 17:29:20 2005)
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※ 引述《[email protected] (好累喔=.=)》之銘言：
> 有人在用overlap pcr做cloning嗎
> 我現在正在試overlap pcr 我是連接三段DNA fragment
> 用的select marker是NAT 要去破壞TUP1的基因
> 可是我試了好多次 就是無法把這三段連接起來
> 有沒有人家裡是做這個的 我是說OVERLAP PCR這方法
> 有成功的高手 可以分享一下你的操作經驗嗎 謝謝
我試過 molecular cloning, ch13 protoco 6
的 overlap extension 來做點突變
如書上所說不斷地跑膠 挖膠 elute 很煩
但是效果不錯
那次我做的很順利
沒有遇到奇怪的問題耶
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◣◢ Author: ubiquitin 從 140.109.40.71 發表
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作者: sdshow (蝶) 看板: Biotech
標題: Re: [方法] overlap pcr
時間: Thu Sep 8 19:14:02 2005
沒錯，我也是不斷的跑膠、做gel ectraction
你跑pcr的溫度條件，要不要檢示一下看有沒問題
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: ※ 引述《[email protected] (好累喔=.=)》之銘言：
: > 有人在用overlap pcr做cloning嗎
: > 我現在正在試overlap pcr 我是連接三段DNA fragment
: > 用的select marker是NAT 要去破壞TUP1的基因
: > 可是我試了好多次 就是無法把這三段連接起來
: > 有沒有人家裡是做這個的 我是說OVERLAP PCR這方法
: > 有成功的高手 可以分享一下你的操作經驗嗎 謝謝
: 我試過 molecular cloning, ch13 protoco 6
: 的 overlap extension 來做點突變
: 如書上所說不斷地跑膠 挖膠 elute 很煩
: 但是效果不錯
: 那次我做的很順利
: 沒有遇到奇怪的問題耶
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