推 belonging:大感謝 ^^ 總算比較知道狀況了 10/21 18:07
TRAP assay (telomere repeat amplification protocol)
我看了一下 似乎是以PCR的原理來設計一組KITs
裡面 TS 跟 CX primer 分別作用為何呢
還有看圖裡面
他會跑出很多條BAND
要得知telomerase作用活性強弱
該從哪裡下手壓 顏色深淺？ BAND的位置？
而不同BAND代表的意義又是什麼
才剛開始接觸 卻看的霧茫茫 煩請專家解答 ＠＠ 多謝拉
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作者: kohigh (向前) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 想問一下關於 TRAP assay
時間: Fri Oct 21 01:09:39 2005
※ 引述《belonging (    N )》之銘言：
: TRAP assay (telomere repeat amplification protocol)
: 我看了一下 似乎是以PCR的原理來設計一組KITs
: 裡面 TS 跟 CX primer 分別作用為何呢
: 還有看圖裡面
: 他會跑出很多條BAND
: 要得知telomerase作用活性強弱
: 該從哪裡下手壓 顏色深淺？ BAND的位置？
: 而不同BAND代表的意義又是什麼
: 才剛開始接觸 卻看的霧茫茫 煩請專家解答 ＠＠ 多謝拉
TS primer設計的和telomere sequence很像 可以被telomerase辨認
telomerase會以RNA為模版在TS primer後面加上6個bp(也可能加兩次12bp)
情形就如同telomerase作用在telomere時 補上失去的片段一樣
然後CX primer可針對那些加上的bp去結合
之後我們可以去進行PCR
可以運用偵測PCR product的方式去看DNA放大的量再反推回telomerase活性
測法有很多種 可以跑電泳用Etbr染色或在primer上label上可偵測信號的物質
像是放射性原素或螢光dye當然也可以結合real-time PCR原理
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