推 nixo:反白的話可能是信號太強了，ECL被消耗掉。 08/19 19:03
→ kirby0415:是喔?那我再去查查看 謝謝~ 08/20 12:22
想請問板上有做過NORTHERN的各位
我實驗室的NORTHERN不是用kit做的
而是自己配northern所需的buffer
但是最後ECL呈色出來 RNA的地方都反白
但我positive control(是DNA)都一直有做出來
我當初是以為可能再transfer過程 RNA就degrade了
所以去做了dot blot
但結果仍然一樣
那我又想說也許是我要測的那個RNA 在細胞裡的量太少所以看不到
所以我又另外製備了actin probe
想說actin在細胞裡的量很多 看可不可以再跟probe hybridization到
但是結果一樣 就是RNA又反白
我們的probe是用biotin-avidin的方式偵測的
所以想請教有經驗的各位
我的northern到底是哪裡出了問題？
謝謝囉！
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