作者boyo (29大頭)
看板Biotech
標題Re: [問題] NORTHERN一直做不出來
時間Sun Aug 19 01:13:54 2007
※ 引述《kirby0415 ()》之銘言:
: 想請問板上有做過NORTHERN的各位
: 我實驗室的NORTHERN不是用kit做的
: 而是自己配northern所需的buffer
: 但是最後ECL呈色出來 RNA的地方都反白
: 但我positive control(是DNA)都一直有做出來
: 我當初是以為可能再transfer過程 RNA就degrade了
: 所以去做了dot blot
: 但結果仍然一樣
: 那我又想說也許是我要測的那個RNA 在細胞裡的量太少所以看不到
: 所以我又另外製備了actin probe
: 想說actin在細胞裡的量很多 看可不可以再跟probe hybridization到
這個邏輯是對的 可是你要先檢查你設計出來跟做好的的probe是否可以用
方法是先製備一些test用的membrane 然後跑test probe
確定可以用再接下去其他的實驗
: 但是結果一樣 就是RNA又反白
: 我們的probe是用biotin-avidin的方式偵測的
: 所以想請教有經驗的各位
: 我的northern到底是哪裡出了問題?
: 謝謝囉!
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When you have eliminated the impossible,
whatever remains,
however improbable,
must be the truth.
" 四簽名 " 科南道爾
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◆ From: 211.74.121.81
推 pshamrock:公司貨到底什麼時候出!! 08/19 02:10
推 HIbaby:這要問總公司 08/19 11:55
推 tsubasawolfy:是柏油耶... 08/19 12:33
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推 boyo:................................ 08/19 22:45
推 kirby0415:嗯 謝謝你的建議~ 08/20 12:21