推 ROKEE:偷問一下，我要做inverse PCR，夾10kb的self-ligate DNA 07/09 00:47
→ ROKEE:版上有高人可以指點一下嗎?@_@ 失敗很多次了 /_\~~ 07/09 00:48
推 melodyrabbit:你的template用的是什麼library?還有你試過什麼條件ꤠ 07/10 00:52
推 pj0611:我也覺得你把條件列出來會比較好...關於primer可以自己設計 07/10 15:52
最近要P約3000bps的一段full lenth cDNA
因為primer沒得選擇只能用ORF的頭尾兩段
廠商送來的Primer Tm值差了約5度左右 (61度&56度 G/C約50%)
但是一直P不出來 快要發瘋了
想請問一下各位高手 P大片段DNA時所用的condition是怎樣呢?
或者有什麼要注意的地方呢?
謝謝大家指教 ^^
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