作者hal (Acer NB 使用中...)
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標題Re: [問題] 收cancer cell RNA sample 的兩種方法?
時間Fri Jun 9 12:31:14 2006
※ 引述《picar (picar)》之銘言:
: 請問一下收culture cancer cell RNA的時候
: 是直把直接trizol加入dish裡面然後再刮下來
: 還是先trysin下來之後再加trizol
: 我會問這個問題是因為
: 有的細胞處理之後會浮起來
: 我想收浮起來的細胞
: 如果直接加trizol的話,那吸medium的時候那此浮的cell就沒收到了
: 可是我想到
: 其實trypsin對cell也是一種stress
: 在trysin的過程中(包含離心等)
: 會不會有一些transcription的變化使RNA level改變呢?
: 而直接加trizol的話就能固定當時的RNA量
: 但會有收不到浮起的cell的問題
: 請問大家都是怎麼收RNA的呢
: 謝謝
你可以把medium收到離心管...
去離心
先把dish裡的cell先用trizol收
在用這個trizol在去收你離心下的細胞
這樣應該都可以收了
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◆ From: 140.109.42.2
推 picar:謝謝… 不過這樣如何拿捏trizol的用量,15cm的dish是加3ml 06/09 14:09
→ picar:那現在是2ml加dish 1ml加離心後的cell? 06/09 14:11
推 hal:我可能是先3ml加dish再取出來加到離心管 06/10 01:28
→ hal:你的方法也是可以的不過dish裡的會不會溶不好就不知了 06/10 01:30
推 mandible:3ml的trizol不會太多嗎? 06/10 13:04