→ vandia:如果是我,我會用RNAfter+一般冰桶,sample泡下去時先剪碎 03/12 00:26
→ vandia:不過這樣可能要帶好多好多把滅菌過的剪刀 03/12 00:27
→ Ianthegood:直接剪碎丟進trizol? 03/12 03:58
→ Ianthegood:我們是常常就冰桶帶回來再處理耶XD 03/12 03:59
推 batatas:不要處理直接丟buffer帶回去再弄呢? 03/12 21:43
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作者: kingbar () 看板: Biotech
標題: Re: [求救] 保存植物組織以供RNA萃取用的方法
時間: Mon Mar 12 01:47:35 2012
※ 引述《Onagraceae (Epilobium)》之銘言：
: 各位版友大家好
: 最近有需要自野外採集些植物組織(花芽)回實驗室萃取RNA
: 但是，實驗室到「最近」能採的地方都有點距離
: 液態氮桶保存又有一些風險
: (而且我們家也沒小型的液態氮桶可以讓我帶出遠門orz)
: 想問一下有沒有些合適的方法或試劑
: 可以在野外將植物組織作簡單的處理
: 再帶回實驗室處理的呢?
: 目前我有看到用RNA LATER
: 不曉得用過的版友心得如何？
: 這用在植物上會不會很難penetration？
: (組織是花芽，約2-3mm的，但會收集很多量)
: 後續有沒有問題，或有更推薦的試劑？
: 感謝各位版友的指教了<(_ _)>
我覺得使用液態氮沒這麼困難耶~
我們是用類似這種保溫瓶http://ppt.cc/y8_S
比液態氮桶便宜多了，只是需要想辦法把出水口封起來(ex parafilm)
sample的話小一點的用鋁箔紙包
缺點是寫在上面的字碰到液態氮很容易掉
也許用抗凍筆就不會了，我沒試過...
大一點的可以用蓋子戳洞(by 粗針頭)的eppendorf裝
因為需要戳洞，所以sample比洞小的話可能會掉出來
我通常是裝約1/4~1/3的液態氮，sample可以盡量塞塞到滿為止
早上9點騎機車出發
即使是夏天，到下午兩三點回實驗室後液態氮都還會有剩
這跟使用試劑比起來算是比較克難但也較省錢的方法
也許對你來說不一定實用，不過還是給你參考看看囉~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.165.100.24
推 yawai:那用乾冰呢?? 雖然有點貴而且不容易買到 03/12 09:52
→ yawai:sample可以裝在小夾鏈袋中再丟進液態氮 不過要戳洞或不密閉 03/12 09:53
→ yawai:不然從液態氮拿出來的時候... 會爆炸 XDD 03/12 09:53
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作者: huuban (冰酒瓶子) 看板: Biotech
標題: Re: [求救] 保存植物組織以供RNA萃取用的方法
時間: Tue Mar 13 00:34:21 2012
不知道有點距離是多遠?
十分鐘？還是一小時以上的車程？
我們實驗室用的樣本
印象中我看過最誇張的一次
是幾大包的葉片
因為葉片又多又大，沒辦法塞進冰桶，保麗龍箱也很難裝
也無法現場冷凍打碎 (沒辦法把這些設備帶上山的樣子@@)
我印象很深那時候是一包一包直接送到我們實驗室來的
沒有用任何的示劑保存
但是必須是連著枝條剪下
做實驗的狀況還OK
帶回實驗室再拆解用液氮冷凍就好
我個人的經驗是
如果天氣熱或前一天下過雨就絕對不採樣
如果氣溫許可，天氣也很好，其實植物組織帶著枝條、採集後用塑膠袋裝好放冰上
帶回實驗室再收都是OK的
我看過有做花的也是這樣收，可以收到蠻大量，帶冰桶那鐵定裝不下
而且液氮可能會洩光...
離開枝條就不保證了
如果枝條禁止破壞
那麼還是考慮藥劑吧
甚至冬天收也不必放冰上
樣本仍然可以維持在相當不錯的狀態
過程中必須避免水氣的產生
樣本盡量是乾的
這樣應該都沒有什麼問題
給您參考。
※ 引述《Onagraceae (Epilobium)》之銘言：
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: 想問一下有沒有些合適的方法或試劑
: 可以在野外將植物組織作簡單的處理
: 再帶回實驗室處理的呢?
: 目前我有看到用RNA LATER
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: 這用在植物上會不會很難penetration？
: (組織是花芽，約2-3mm的，但會收集很多量)
: 後續有沒有問題，或有更推薦的試劑？
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作者: stormcorn (0是) 看板: Biotech
標題: Re: [求救] 保存植物組織以供RNA萃取用的方法
時間: Tue Mar 13 01:01:01 2012
: ※ 引述《Onagraceae (Epilobium)》之銘言：
: : 各位版友大家好
: : 最近有需要自野外採集些植物組織(花芽)回實驗室萃取RNA
: : 但是，實驗室到「最近」能採的地方都有點距離
: : 液態氮桶保存又有一些風險
: : (而且我們家也沒小型的液態氮桶可以讓我帶出遠門orz)
: : 想問一下有沒有些合適的方法或試劑
: : 可以在野外將植物組織作簡單的處理
: : 再帶回實驗室處理的呢?
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: : 這用在植物上會不會很難penetration？
: : (組織是花芽，約2-3mm的，但會收集很多量)
: : 後續有沒有問題，或有更推薦的試劑？
: : 感謝各位版友的指教了<(_ _)>
可以用乾冰保存樣本 -40度C 比冰塊低溫而且保持較久
要去乾冰行請老闆切割給你小塊 放在保麗龍盒或其他容器等等
如果不是當天回實驗室的話可以考慮低溫宅配
希望有幫到你
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