近來在跑RNA電泳
希望能把genome DNA除去
就使用某牌子的Dnase
protocol也註明其用法
多少ug/ul RNA 對應多少 U的Dnase
作用 37C 30分鐘
然後再以stop sol.停止反應
問題來了
為何每次跑出來
用了Dnase的都會呈smear的狀態
甚至RNA也好像被減少了
是不是我作用太久了呢?
請教有用過的人能提供一下反應環境和時間好嗎?
好讓我自己把自己方法修過
謝謝
--
▌ ╞═════════════╮ 陽明神農坡 為您的心情觸診
鸞 | | | | | | 》───．… ‧ ︿︿
▌ ╞═════════════╯ ‧ ＊ ︺ ＊
※ Origin: 陽明神農坡 <bbs.ym.edu.tw> ◆ From: 140.129.56.132
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 [email protected] (嘉豪), 看板 Biotech
標題 Re: [請教]Dnase的用法
時間 陽明大學神農坡資訊站 (Thu Nov 18 18:16:44 2004)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
───────────────────────────────────────
※ 引述《[email protected] (嗨北鼻)》之銘言：
> ※ 引述《[email protected] (嘉豪)》之銘言：
> : 可以報牌子的嗎?
> : 我是怕這裡不能報出牌子....
> : 我是用Promega的.....
> 報牌子應該沒有關係
> 這些大廠應該經得起大家的批評和比較的.
先謝謝這位大大的回答
還有有一位大大叫tracy1902的回到我信箱
可惜是我看不到裡面有你打的內容
可能是轉信問題吧
煩請這位大大能再回一次好嗎?謝謝你
是不是我問題問得不好呢?
如果有版友想回我問題,但我問題資料不足
煩請指正~:)
--
▌ ╞═════════════╮ 陽明神農坡 為您的心情觸診
鸞 | | | | | | 》───．… ‧ ︿︿
▌ ╞═════════════╯ ‧ ＊ ︺ ＊
※ Origin: 陽明神農坡 <bbs.ym.edu.tw> ◆ From: 140.129.65.100
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 [email protected] (也是老外), 看板 Biotech
標題 Re: [請教]Dnase的用法
時間 無名小站 (Sat Nov 20 04:25:23 2004)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
───────────────────────────────────────
※ 引述《[email protected] (嘉豪)》之銘言：
> ※ 引述《[email protected] (bio)》之銘言：
> > 《gilchang (也是老外)》之銘言：
> > RQ1?
> 沒錯
> 是Promega的RQ1
1. 新開封?
2. 有很多人用?
3. 要不要用plasmid DNA 去當control測activity
我們家常用RQ1(也只用過RQ1).
我是在想你用的那一管或那一批是不是被污染了
另外, 我們家是用30度30分鐘水浴後冰上1分鐘,
然後在70度作用10分鐘stop, 再放冰上....