推 wildwinds:搖太大力會不會導致RNA斷裂 61.62.118.132 02/27
推 ZecAhau:應該不會 除非拿去vortex :P 140.109.224.35 02/27
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: ZecAhau (World Peace) 看板: Biotech
標題: Re: 請問RNA的問題
時間: Sun Feb 27 14:35:16 2005
※ 引述《[email protected] (短期代板主-無名BioTech)》之銘言：
: ※ 引述《[email protected] (被排擠了)》之銘言：
: > 我是用trizol reagent (Invitorgne)抽culture cells
: > 的total RNA，可是不管怎麼抽，280/260的ratio 都只有在
: > 1.6~1.7左右，請問我可能出了什麼問題嗎? 理論上RNA應該
: > ration在2.0吧! 請大家幫幫我吧! 謝謝!!
其實一直有個問題
我們測OD要看的ratio 不是260/280 嗎
為什麼各位看的是280/260
還是我一直的觀念都錯了??
請賜教 ^^
--
白天不懂夜的黑
太陽不解月的悲
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.224.35
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: wwwjjj (......) 看板: Biotech
標題: Re: 請問RNA的問題
時間: Sat Mar 5 12:26:02 2005
※ 引述《[email protected] (被排擠了)》之銘言：
: 我是用trizol reagent (Invitorgne)抽culture cells
: 的total RNA，可是不管怎麼抽，280/260的ratio 都只有在
: 1.6~1.7左右，請問我可能出了什麼問題嗎? 理論上RNA應該
: ration在2.0吧! 請大家幫幫我吧! 謝謝!!
我抽RNA也從沒超過1.7的
記得還抽過1.2以下的^^"
我覺得除了自己本身技術問題外
也與sample種類、細胞數多寡有關
但是我想請問為什麼稀釋的倍率越高
出來的ratio也會偏低呢？
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.217.105.141
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: aggaci (五子棋啦) 看板: Biotech
標題: Re: 請問RNA的問題
時間: Sat Mar 5 15:12:46 2005
※ 引述《wwwjjj (......)》之銘言：
: ※ 引述《[email protected] (被排擠了)》之銘言：
: : 我是用trizol reagent (Invitorgne)抽culture cells
: : 的total RNA，可是不管怎麼抽，280/260的ratio 都只有在
: : 1.6~1.7左右，請問我可能出了什麼問題嗎? 理論上RNA應該
: : ration在2.0吧! 請大家幫幫我吧! 謝謝!!
: 我抽RNA也從沒超過1.7的
: 記得還抽過1.2以下的^^"
: 我覺得除了自己本身技術問題外
: 也與sample種類、細胞數多寡有關
: 但是我想請問為什麼稀釋的倍率越高
: 出來的ratio也會偏低呢？
因為濃度太低 超出OD260和OD280可信範圍
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.100.165
推 wwwjjj:可是我是因為濃度太高超出可信範圍，才進一步稀釋 59.115.81.58 03/05
推 marksman:請問濃度可信範圍是多少呢?? 218.34.245.72 03/05
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: lirayjay (lirayjay) 看板: Biotech
標題: Re: 請問RNA的問題
時間: Sun Mar 6 11:08:38 2005
可以在加了isopropanol後，拿到-80度冰箱冰over night或至少20分鐘
看有沒有幫助
※ 引述《wwwjjj (......)》之銘言：
: ※ 引述《[email protected] (被排擠了)》之銘言：
: : 我是用trizol reagent (Invitorgne)抽culture cells
: : 的total RNA，可是不管怎麼抽，280/260的ratio 都只有在
: : 1.6~1.7左右，請問我可能出了什麼問題嗎? 理論上RNA應該
: : ration在2.0吧! 請大家幫幫我吧! 謝謝!!
: 我抽RNA也從沒超過1.7的
: 記得還抽過1.2以下的^^"
: 我覺得除了自己本身技術問題外
: 也與sample種類、細胞數多寡有關
: 但是我想請問為什麼稀釋的倍高
: 出來的ratio也會偏低呢？
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.64.173.246
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: noodle (noodle) 看板: Biotech
標題: Re: 請問RNA的問題
時間: Mon Mar 7 19:33:57 2005
※ 引述《wwwjjj (......)》之銘言：
: ※ 引述《[email protected] (被排擠了)》之銘言：
: : 我是用trizol reagent (Invitorgne)抽culture cells
: : 的total RNA，可是不管怎麼抽，280/260的ratio 都只有在
: : 1.6~1.7左右，請問我可能出了什麼問題嗎? 理論上RNA應該
: : ration在2.0吧! 請大家幫幫我吧! 謝謝!!
: 我抽RNA也從沒超過1.7的
: 記得還抽過1.2以下的^^"
: 我覺得除了自己本身技術問題外
: 也與sample種類、細胞數多寡有關
: 但是我想請問為什麼稀釋的倍率越高
: 出來的ratio也會偏低呢？
試試看在稀釋測吸光值的時候, 用TE buffer dilute, 我們實驗室裡這樣做,
得到的OD260/280會比用水稀釋要來的高..
--
總是在快樂的時候,感到微微的惶恐.
在開懷大笑時,留下感動的淚水.
我無法相信單純的幸福.
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.40.41
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: [email protected] (短期代板主-無名BioTech), 看板: Biotech
標 題: Re: 請問RNA的問題
發信站: 無名小站 (Tue Mar 8 00:18:41 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!wretch
※ 引述《[email protected] (noodle)》之銘言：
> ※ 引述《wwwjjj (......)》之銘言：
> : 我抽RNA也從沒超過1.7的
> : 記得還抽過1.2以下的^^"
> : 我覺得除了自己本身技術問題外
> : 也與sample種類、細胞數多寡有關
> : 但是我想請問為什麼稀釋的倍率越高
> : 出來的ratio也會偏低呢？
> 試試看在稀釋測吸光值的時候, 用TE buffer dilute, 我們實驗室裡這樣做,
> 得到的OD260/280會比用水稀釋要來的高..
個人是不建議用TE buffer
因為solution pH偏鹼
容易造成RNA鹼水解
這也或許是為什麼OD ration比較高的原因之一吧
--
夫兵者不祥之器物或惡之故有道者不處君子居則貴左用兵則貴右兵者不祥之器非君子
之器不得已BBS telnet://bbs.wretch.cc 開個人板 超快 不用連署不可得志於天下
矣吉事尚左凶事尚右偏將軍居左上將軍居右言以喪禮處之殺人之眾以哀悲泣之戰勝以
喪禮處之道常無名樸雖小天下莫能臣侯王若能守之萬物將自賓天地相合以降甘露民莫
之令而自均始制有名名亦既有夫亦將知止知止可以不殆譬道之在天 140.109.40.39海