推 ghjkl:其實我的實驗室都沒有滅菌 但在取用的時候都會很小心就是了 09/19 22:04
→ ghjkl:不過說真的 還是滅會比較安心 09/19 22:04
推 KaurJmeb:有滅有保蔽 09/19 23:31
推 liuse:滅了比較好吧 09/20 00:08
推 Liebesleid:滅 +1 09/20 00:08
推 coyot:我想問個問題 不滅菌如何知道裡面全無其他病毒細菌? 那你抽 09/20 01:07
→ coyot:的病毒RNA 如何知道是純的你要的病毒之RNA? 09/20 01:09
推 ghjkl:那就算滅了已經在裡面都東西還是在裡面阿 09/20 12:02
推 sachem:滅心安吧.....滅加一 09/20 12:59
推 pehua:有人不僅滅了...還和其他實驗都分開用 09/20 14:25
推 ghjkl:分開是一定要的 09/20 21:27
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作者: flavivirus (flavivirus) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
時間: Wed Sep 21 00:21:18 2005
※ 引述《flavivirus (flavivirus)》之銘言：
: 標題: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
: 時間: Mon Sep 19 21:35:01 2005
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: ◆ From: 218.184.113.112
: 推 ghjkl:其實我的實驗室都沒有滅菌 但在取用的時候都會很小心就是了 09/19 22:04
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: 推 ghjkl:那就算滅了已經在裡面都東西還是在裡面阿 09/20 12:02
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: 推 ghjkl:分開是一定要的 09/20 21:27
感謝大家的熱心回答..........
說實話 我自己也是覺得有滅有保庇
壞就壞在 有人要成立"分生"實驗室 卻沒有半丁點的分生概念
沒概念還可能可以憑點運氣 做八字比較硬的DNA也就算了
要命的是居然想做最怕污染的RNA! PCR!!!
請他滅菌 他說沒這設備
我好怕他做不出來的時候怪我賣他的東西爛又貴
話說回來 有人知道滅菌是在滅啥意思呢?
我覺得雖然叫"滅菌" 但目的是要破壞RNase
因為管子裡的菌就算滅了
它的核酸 一樣會被抽出來呀
各位以為如何?
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◆ From: 218.184.113.112
推 coyot:滅菌是指高溫或紫外線嗎? 那應該會連DNA RNA一起降解掉吧 09/21 00:23
推 stonegirl:可是用autoclave是無法消滅RNase的活性耶 09/21 01:26
推 kktt1205:RNA的不是會加DEPC水一起滅嗎... 09/21 01:43
推 sachem:RNase比小強還猛啦....光滅菌是不夠的 09/21 10:08
推 hyellow:你可以特別寫一張「若未經適當RNA處理，本公司不保證...」 09/21 10:42
→ hyellow:的聲明給他。 09/21 10:44
推 Resd:我們會所有能滅的都先泡過DEPC water再滅耶 比較心安啦 09/21 10:52
推 ghjkl:標準應該是每個tip插好之後在滴上DEPC水作用overnight後 09/21 17:47
→ ghjkl:用滅菌鍋把DEPC水滅掉吧 09/21 17:48
→ ghjkl:不過我試過現在的Tip或microtube都已經是RNase free的 09/21 17:49
→ ghjkl:所以不這樣處理其實也不太會污染但有滅有保障就是了 09/21 17:50
推 Shamino:RNase沒這麼好滅掉啦..... 09/23 00:00
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作者: noodle (noodle) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
時間: Sat Sep 24 23:23:55 2005
其實不滅菌也不會有問題, 只要你的東西打開包裝後都是用手套取用,
用完之後都有包好不要沾到灰塵其實都OK, 不過tip的話。。。
最好還是用filter tip, 不然就算tip再乾淨, pipetmen要是不乾淨就糟了。。
--
總是在快樂的時候,感到微微的惶恐.
在開懷大笑時,留下感動的淚水.
我無法相信單純的幸福.
--
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◆ From: 140.109.40.41
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作者: flavivirus (flavivirus) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
時間: Sun Sep 25 01:51:34 2005
再次感謝大家的回覆
我自己也試著找了些答案
才發現自己的無知比客戶好不到哪去
不知道有沒有這樣的一本書
是專門解釋各種實驗步驟的目的及原理的呢?
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◆ From: 218.184.113.112
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發信人: [email protected] (教師要夠專業), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
發信站: 不良牛牧場 (Sun Sep 25 06:54:32 2005)
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要用的器具要先用 DEPC水洗過，
操作抽RNA時要wear口罩。
※ 引述《[email protected] (noodle)》之銘言：
: 其實不滅菌也不會有問題, 只要你的東西打開包裝後都是用手套取用,
: 用完之後都有包好不要沾到灰塵其實都OK, 不過tip的話。。。
: 最好還是用filter tip, 不然就算tip再乾淨, pipetmen要是不乾淨就糟了。。
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發信人: [email protected] ( ★愛吃鬼的幸福:P★), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
發信站: 新綠園 (Sun Sep 25 15:46:12 2005)
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做RNA實驗時 大部分都是用DEPC來抑制RNase嗎?
DEPC不是揮發性的致癌劑嗎??
看見學長使用它時也沒有特別小心耶!!而且還噴很多!!
是因為稀釋到濃度很低就沒有關係了嗎?
※ 引述《[email protected] (教師要夠專業)》之銘言：
> 要用的器具要先用 DEPC水洗過，
> 操作抽RNA時要wear口罩。
> ※ 引述《[email protected] (noodle)》之銘言：
> : 其實不滅菌也不會有問題, 只要你的東西打開包裝後都是用手套取用,
> : 用完之後都有包好不要沾到灰塵其實都OK, 不過tip的話。。。
> : 最好還是用filter tip, 不然就算tip再乾淨, pipetmen要是不乾淨就糟了。。
--
一個人能夠在這個世界上找到自己喜歡 也喜歡自己的人
能夠互相扶持 互相包容地一直走下去...
是件很幸福的事情~
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作者: mikoyan (mikoyan) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
時間: Sun Sep 25 16:03:08 2005
※ 引述《[email protected] ( ★愛吃鬼的幸福:P★)》之銘言：
: 做RNA實驗時 大部分都是用DEPC來抑制RNase嗎?
: DEPC不是揮發性的致癌劑嗎??
: 看見學長使用它時也沒有特別小心耶!!而且還噴很多!!
: 是因為稀釋到濃度很低就沒有關係了嗎?
這就是有些同學他們猛的地方?
做EtBr不戴手套....
半導體製程中
使用 HMDS [ 提高光阻和晶片的附著性 , 高度揮發性 , 高度致癌因子 ]
也不戴豬鼻子濾毒罐
倒 HMDS 像倒水一樣.....
實驗要做 身體也是要顧的阿 !!
papers 沒發幾篇
住院單先拿幾張 這樣就不好了 ..... ^^b
: ※ 引述《[email protected] (教師要夠專業)》之銘言：
: > 要用的器具要先用 DEPC水洗過，
: > 操作抽RNA時要wear口罩。
--
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◆ From: 140.110.119.62
推 pfk:DEPC在加熱滅過菌後不會有致癌性 但是滅菌之前確實是有的 09/25 16:23
推 ghjkl:是阿 標準程序不是DEPC作用overnight後用滅菌鍋把DEPC去活性 09/25 16:28
推 ksksks:也可使用MOPS.... 09/25 18:24
推 ROKEE:其實大家應該都還要在這行混很久... 09/25 19:08
→ ROKEE:所以建議還是多保護自己一下 09/25 19:08
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作者: aggaci (好想學鋼琴阿!!) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
時間: Sun Sep 25 21:52:27 2005
※ 引述《[email protected] ( ★愛吃鬼的幸福:P★)》之銘言：
: 做RNA實驗時 大部分都是用DEPC來抑制RNase嗎?
: DEPC不是揮發性的致癌劑嗎??
: 看見學長使用它時也沒有特別小心耶!!而且還噴很多!!
: 是因為稀釋到濃度很低就沒有關係了嗎?
: ※ 引述《[email protected] (教師要夠專業)》之銘言：
: > 要用的器具要先用 DEPC水洗過，
: > 操作抽RNA時要wear口罩。
DEPC經過autoclave會分解成CO2+H2O
所以依定要autoclave，但滅過菌後就免驚了
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◆ From: 140.114.63.11
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發信人: [email protected] ( ★愛吃鬼的幸福:P★), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
發信站: 新綠園 (Mon Sep 26 00:09:21 2005)
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※ 引述《[email protected] (好想學鋼琴阿!!)》之銘言：
> ※ 引述《[email protected] ( ★愛吃鬼的幸福:P★)》之銘言：
> : 做RNA實驗時 大部分都是用DEPC來抑制RNase嗎?
> : DEPC不是揮發性的致癌劑嗎??
> : 看見學長使用它時也沒有特別小心耶!!而且還噴很多!!
> : 是因為稀釋到濃度很低就沒有關係了嗎?
> DEPC經過autoclave會分解成CO2+H2O
> 所以依定要autoclave，但滅過菌後就免驚了
那滅菌完後不是都分解成水了 還會有抑制RNase的效果嗎?
:P我真的不懂....拍謝~問笨問題
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能夠互相扶持 互相包容地一直走下去...
是件很幸福的事情~
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推 ghjkl:所以用完馬上關起來避免污染阿 09/26 01:04
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發信人: [email protected] (到頭來只是個墻外行人), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
發信站: 無名小站 (Wed Sep 28 23:14:32 2005)
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※ 引述《[email protected] ( ★愛吃鬼的幸福:P★)》之銘言：
> ※ 引述《[email protected] (好想學鋼琴阿!!)》之銘言：
> > DEPC經過autoclave會分解成CO2+H2O
> > 所以依定要autoclave，但滅過菌後就免驚了
> 那滅菌完後不是都分解成水了 還會有抑制RNase的效果嗎?
> :P我真的不懂....拍謝~問笨問題
不會
用DEPC處理過的水去洗操作用具是一點用都沒有的
想像一下, 如何用一個"超級乾淨"的水讓RNase 失去之後的活性?
也沒聽說過"DEPC water"處理操作用具的protocol
那也太有錢了吧?! 應該是筆誤或是洗安心的
一般用雙氧水或是NaOH處理就行了
最好能將RNA 用具與一般實驗用者分離 (要不然就勤快些)
然後 有口罩最好能戴上
窗戶關上, 不要吹電扇或自然風....
--
夫兵者不祥之器物或惡之故有道者不處君子居則貴左用兵則貴右兵者不祥之器非君子
之器不得已而用之恬淡為上勝而不美而美之者是樂殺人夫樂殺人者則不可得志於天下
矣吉事尚左凶事尚右偏將軍居左上將軍居右言以喪禮處之殺人之眾以哀悲泣之戰勝以
喪禮處之道常無名樸雖小天下莫能臣侯王若能守之萬物將自賓天地相合以降甘露民莫
之令而自均始制有名名亦既有夫亦將知止知止 218-167-12-68.dynamic.hinet.net海
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作者: oxoox (仵作) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 抽RNA需要滅菌嗎
時間: Mon Nov 7 21:58:43 2005
說一下我們實驗室抽rna神奇的流程
(我第一次抽的時候也覺得很神奇)
在我們實驗室 抽RNA不用戴手套 口罩
tip eppendorf也不用特別滅菌
我們抽的sample是血液
4cc的血 每1ul可以抽到10^6
上次有廠商來推銷磁珠式抽RNA的kit~
我跟他說 你的東西太貴了 也不太符合我們的需求
一個10^8次方的kit要將近1000元
不管有多少sample一次就是只能得到這樣多的量
我們實驗室的流程多一點血 就可以得到多一點的RNA
花的成本也不高....
呵呵 可能抽細菌細胞的RNA跟抽血液的不一樣吧 :P
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◆ From: 211.74.220.229
推 hal:大大...4cc的血 每1ul可以抽到10^6...這有點不懂ㄟ... 11/07 22:09
推 oxoox:4cc的血 轉成cDNA之後是30ul 取1ul去跑rt 可得10^6 11/08 23:10