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我想請問一下有沒有不用trypsin就可以將細胞打下來的方法呢 或是一些比較不會傷到細胞膜的方法 因為想看膜上蛋白在細胞的表現 希望打下時仍是完好的細胞 但是一加trypsin那蛋白就會變性了 所以想請教一下有沒有什麼方法可以替代trypsin的 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.162.76.220 > --------------------------------------------------------------------------- < 作者 yowsien (D@nEL) 看板 Biotech 標題 Re: [問題] 我想請問一下,把細胞打下來的方法 時間 Sun Nov 14 17:46:28 2004 ─────────────────────────────────────── ※ 引述《ashywoof (我不知道我不知道)》之銘言: : 我想請問一下有沒有不用trypsin就可以將細胞打下來的方法呢 : 或是一些比較不會傷到細胞膜的方法 : 因為想看膜上蛋白在細胞的表現 : 希望打下時仍是完好的細胞 : 但是一加trypsin那蛋白就會變性了 : 所以想請教一下有沒有什麼方法可以替代trypsin的 用你目前使用的culture medium即可阿 只是要比較累..必須用pipet aid 多沖幾下 試試看吧~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.219.19.36
keku:沒錯 很多細胞都是沖一沖就可以沖下來 140.109.214.254 11/14
ashywoof:謝謝...我去試試 218.162.86.146 11/15
> --------------------------------------------------------------------------- < 作者 keku (月光下輕舞) 看板 Biotech 標題 Re: [問題] 我想請問一下,把細胞打下來的方法 時間 Sun Nov 14 23:43:42 2004 ─────────────────────────────────────── ※ 引述《ashywoof (我不知道我不知道)》之銘言: : 我想請問一下有沒有不用trypsin就可以將細胞打下來的方法呢 : 或是一些比較不會傷到細胞膜的方法 : 因為想看膜上蛋白在細胞的表現 : 希望打下時仍是完好的細胞 : 但是一加trypsin那蛋白就會變性了 : 所以想請教一下有沒有什麼方法可以替代trypsin的 試試看用TEG代替 可不可以免去傷害 這有保護細胞外表的功能 配方如下 TEG solution: a mixture containing 0.05mM trypsin, 2.5mM ehtyldiaminetetraacetic acid (EDTA), 2.8mM glucose -- ******** PTT 統合生命科學研究院 Biotech 生醫工程研究所 超高解析率顯微技術 研究室 ******** -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.214.254
ashywoof:謝謝 218.162.86.146 11/15
> --------------------------------------------------------------------------- < 作者 Resd (遙遠的未來) 看板 Biotech 標題 Re: [問題] 我想請問一下,把細胞打下來的方法 時間 Mon Nov 15 11:15:47 2004 ─────────────────────────────────────── ※ 引述《keku (月光下輕舞)》之銘言: : ※ 引述《ashywoof (我不知道我不知道)》之銘言: : : 我想請問一下有沒有不用trypsin就可以將細胞打下來的方法呢 : : 或是一些比較不會傷到細胞膜的方法 : : 因為想看膜上蛋白在細胞的表現 : : 希望打下時仍是完好的細胞 : : 但是一加trypsin那蛋白就會變性了 : : 所以想請教一下有沒有什麼方法可以替代trypsin的 : 試試看用TEG代替 可不可以免去傷害 這有保護細胞外表的功能 : 配方如下 : TEG solution: : a mixture containing 0.05mM trypsin, 2.5mM : ehtyldiaminetetraacetic acid (EDTA), 2.8mM glucose TEG我們是買現成的耶 另外 raw cell 都是直接打 用右手抓住flask 往左手掌肉最多的部份拍 cell就會下來了 -- ******** PTT 統合生命科學研究院 Biotech 生物醫學研究所 病毒研究室 ******** -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.220.178.27