推 saviora:細胞上的蛋白要多保重 220.143.125.48 03/07
推 apa9394:尤其是膜上的receptor, intergrin等protein... 140.129.72.15 03/07
為什麼是用trypsin將細胞打下來...
好像也有人用EDTA...或者是兩者混合...差別在哪裡呢?
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新手上路請多指教:p
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.164.147.93
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作者: chinj ( ) 看板: Biotech
標題: Re: 關於養細胞的問題...
時間: Sun Mar 6 21:36:08 2005
※ 引述《chinj ( )》之銘言：
: 為什麼是用trypsin將細胞打下來...
: 好像也有人用EDTA...或者是兩者混合...差別在哪裡呢?
: 還是有其他也可以用的?
: ---
: 新手上路請多指教:p
拜託知道的大大告訴我一下嘛T_T
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.164.159.9
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: ptt0 (我是白痴) 看板: Biotech
標題: Re: 關於養細胞的問題...
時間: Sun Mar 6 22:36:12 2005
※ 引述《chinj ( )》之銘言：
: ※ 引述《chinj ( )》之銘言：
: : 為什麼是用trypsin將細胞打下來...
: : 好像也有人用EDTA...或者是兩者混合...差別在哪裡呢?
: : 還是有其他也可以用的?
: : ---
: : 新手上路請多指教:p
: 拜託知道的大大告訴我一下嘛T_T
我們老師上課的時候是說
trypsin是一種peptidase 所以可以切掉一些和cell attachment有關的蛋白
因為是切蛋白 所以濃度和時間也都要控制好
另外EDTA 可以chelate很多metal ion
因為很多這些蛋白的cofater都是metal
把cofacter抓走 這些蛋白變inactive
cell就掉下來了
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似乎是降
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.220.201
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: cleanbottle.bbs@bbs.badcow.com.tw (拋不開的回憶...沉重), 看板: Biotech
標 題: Re: 關於養細胞的問題...
發信站: 不良牛牧場 (Sun Mar 6 22:36:40 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!SimFarm
※ 引述《chinj.bbs@ptt.cc ( )》之銘言：
: 標 題: Re: 關於養細胞的問題...
: 發信站: 批踢踢實業 (Sun Mar 6 13:36:09 2005)
: 轉信站: SimFarm!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!ptt
:
: ※ 引述《chinj ( )》之銘言：
: : 為什麼是用trypsin將細胞打下來...
: : 好像也有人用EDTA...或者是兩者混合...差別在哪裡呢?
: : 還是有其他也可以用的?
通常在calture dish的底部有coating一層蛋白質
主要是讓細胞附著用...
trypsin主要是切細胞附著底部的蛋白質絲...讓細胞漂起來
EDTA是鈣離子的螯合劑...會去抓鈣離子
而細胞衍伸出來的蛋白質絲與dish底部coating的蛋白質間有一部份是鈣離子所連接
所以根據這兩個方式....
不論是單獨trypsin或EDTA...或是兩者混合...
都可以達到我們欲將細胞打下來的目的
至於差別嘛....我自己的感覺是....兩者混合...可以較輕易將細胞切下來~
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『不論邂逅在任何地方，妳都是我的最愛』
在風中朗誦著宛如故事般...溫柔
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標 題: Re: 關於養細胞的問題...
發信站: 新綠園 (Mon Mar 7 00:12:23 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!ncyusa
※ 引述《ptt0.bbs@ptt.cc (我是白痴)》之銘言：
> ※ 引述《chinj ( )》之銘言：
> : 拜託知道的大大告訴我一下嘛T_T
> 我們老師上課的時候是說
> trypsin是一種peptidase 所以可以切掉一些和cell attachment有關的蛋白
> 因為是切蛋白 所以濃度和時間也都要控制好
> 另外EDTA 可以chelate很多metal ion
> 因為很多這些蛋白的cofater都是metal
> 把cofacter抓走 這些蛋白變inactive
> cell就掉下來了
既然trypsin是酵素 有專一性
卻聽學姊說作用太久會傷害細胞!?
請問他是如何的傷害細胞...???
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