推 hyellow:有這個機會 140.109.55.58 04/25
推 apa9394:你們lab有做動物實驗嗎?有的話要特別小心~~~ 140.129.72.15 04/25
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發信人: Rebeca.bbs@perl.tcu.edu.tw (新娘18歲), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題]細胞培養污染了
發信站: Perl (Mon Apr 25 17:41:35 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!Perl
※ 引述《biobitch.bbs@ptt.cc (失戀的女人碰不得)》之銘言：
: 我已經看過前面的文章
: 跟我所遇到的問題很像可是又不太相同
: 大致上是這樣的
: 細胞培養後會有很小很小的黑色點點.會動啊動的>.<生長速度很慢,
: 放幾天也不會造成medium 混濁,老實說我看不太出來是不是污染
: 可是實驗室普遍有這樣的現象,過濾medium也沒用
: 會不會是霉漿菌啊
你們家的血清是購於萊富嘛?
我培養的cell line也會有黑點
不過我問了sales後
他說來富的血清都會這樣
細胞培養有小黑點又會動
他解釋是血清...(我忘了)什麼的布郎分子運動
是正常的現象
也不知是不是真的
不過看cell長得頭好壯壯
就沒想太多了
--
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╬═╯ 作者來自 140.109.40.11
╩ｅｒｌ 蔚藍海岸 perl.tcu.edu.tw (203.64.80.217)
推 biobitch:看成來薾富... 218.168.130.43 04/25
推 keku:他沒打錯啊 本來就是萊富140.109.225.161 04/25
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作者: lpw4660 (lpw4660) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]細胞培養污染了
時間: Mon Apr 25 19:01:18 2005
※ 引述《Rebeca.bbs@perl.tcu.edu.tw (新娘18歲)》之銘言：
: ※ 引述《biobitch.bbs@ptt.cc (失戀的女人碰不得)》之銘言：
: : 我已經看過前面的文章
: : 跟我所遇到的問題很像可是又不太相同
: : 大致上是這樣的
: : 細胞培養後會有很小很小的黑色點點.會動啊動的>.<生長速度很慢,
: : 放幾天也不會造成medium 混濁,老實說我看不太出來是不是污染
: : 可是實驗室普遍有這樣的現象,過濾medium也沒用
: : 會不會是霉漿菌啊
: 你們家的血清是購於萊富嘛?
: 我培養的cell line也會有黑點
: 不過我問了sales後
: 他說來富的血清都會這樣
: 細胞培養有小黑點又會動
: 他解釋是血清...(我忘了)什麼的布郎分子運動
: 是正常的現象
: 也不知是不是真的
: 不過看cell長得頭好壯壯
: 就沒想太多了
建議看看小黑點是否有變多
把他多擺幾天看看
若是污染會變多蠻明顯的
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.65.165
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作者: StillRick (事情真多) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]細胞培養污染了
時間: Mon Apr 25 21:21:43 2005
※ 引述《lpw4660 (lpw4660)》之銘言：
: ※ 引述《Rebeca.bbs@perl.tcu.edu.tw (新娘18歲)》之銘言：
: : 你們家的血清是購於萊富嘛?
: : 我培養的cell line也會有黑點
: : 不過我問了sales後
: : 他說來富的血清都會這樣
: : 細胞培養有小黑點又會動
: : 他解釋是血清...(我忘了)什麼的布郎分子運動
: : 是正常的現象
: : 也不知是不是真的
: : 不過看cell長得頭好壯壯
: : 就沒想太多了
: 建議看看小黑點是否有變多
: 把他多擺幾天看看
: 若是污染會變多蠻明顯的
直接拿completemedium在50 mLtube 37度C搖菌
隔夜就知道是不是污染了
--
慢慢接受
自己不過是常態曲線中的一點
在曲線的無限切割下
不佔空間，不俱體積。
--
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◆ From: 140.112.130.230
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作者: Seal13 (想和你再去吹吹風.) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]細胞培養污染了
時間: Tue Apr 26 00:10:42 2005
※ 引述《StillRick (事情真多)》之銘言：
: ※ 引述《lpw4660 (lpw4660)》之銘言：
: : 建議看看小黑點是否有變多
: : 把他多擺幾天看看
: : 若是污染會變多蠻明顯的
: 直接拿completemedium在50 mLtube 37度C搖菌
: 隔夜就知道是不是污染了
我之前待的實驗室也是有這樣的情形
應該是同一批的血清都有黑點
我們以前也以為是污染
因為顯微鏡下看起來會動
sales也是那樣說的
還是持續觀察自己的細胞
時時注意好點
因為聽信sales的話不一定有用
--
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◆ From: 61.229.201.164
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作者: boyo (29大頭) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]細胞培養污染了
時間: Tue Apr 26 00:16:46 2005
※ 引述《biobitch (失戀的女人碰不得)》之銘言：
: 我已經看過前面的文章
: 跟我所遇到的問題很像可是又不太相同
: 大致上是這樣的
: 細胞培養後會有很小很小的黑色點點.會動啊動的>.<生長速度很慢,
: 放幾天也不會造成medium 混濁,老實說我看不太出來是不是污染
: 可是實驗室普遍有這樣的現象,過濾medium也沒用
: 會不會是霉漿菌啊
Mycoplasma顯微鏡底下是看不到的
要用kit才測的出來
所以還是照前面版友講的
取一部分疑似污染的medium 加入medium在37度C養菌用incubator一晚再觀察
要做一個negative control
有可能是血清中有混雜顆粒
但是也有可能是長比較無毒的菌
--
天空沒有翅膀的痕跡
但我曾經飛翔
泰戈爾
--
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◆ From: 221.169.50.122
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作者: StillRick (事情真多) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]細胞培養污染了
時間: Tue Apr 26 20:58:33 2005
※ 引述《boyo (29大頭)》之銘言：
: ※ 引述《biobitch (失戀的女人碰不得)》之銘言：
: : 我已經看過前面的文章
: : 跟我所遇到的問題很像可是又不太相同
: : 大致上是這樣的
: : 細胞培養後會有很小很小的黑色點點.會動啊動的>.<生長速度很慢,
: : 放幾天也不會造成medium 混濁,老實說我看不太出來是不是污染
: : 可是實驗室普遍有這樣的現象,過濾medium也沒用
: : 會不會是霉漿菌啊
: Mycoplasma顯微鏡底下是看不到的
: 要用kit才測的出來
用DNA dye，例如Hochest或者DAPI，在400X的倍率下
如果有mycoplasma contamination
會有細胞核以外的小亮點或模糊的亮區。
: 所以還是照前面版友講的
: 取一部分疑似污染的medium 加入medium在37度C養菌用incubator一晚再觀察
: 要做一個negative control
: 有可能是血清中有混雜顆粒
: 但是也有可能是長比較無毒的菌
--
慢慢接受
自己不過是常態曲線中的一點
在曲線的無限切割下
不佔空間，不俱體積。
--
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◆ From: 61.70.176.184
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作者: ghjkl (想去加勒比海釣魚) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]細胞培養污染了
時間: Wed Apr 27 01:13:27 2005
※ 引述《StillRick (事情真多)》之銘言：
: ※ 引述《boyo (29大頭)》之銘言：
: : Mycoplasma顯微鏡底下是看不到的
: : 要用kit才測的出來
: 用DNA dye，例如Hochest或者DAPI，在400X的倍率下
: 如果有mycoplasma contamination
: 會有細胞核以外的小亮點或模糊的亮區。
: : 所以還是照前面版友講的
: : 取一部分疑似污染的medium 加入medium在37度C養菌用incubator一晚再觀察
: : 要做一個negative control
: : 有可能是血清中有混雜顆粒
: : 但是也有可能是長比較無毒的菌
我們的測試方法簡單一點
就是把可能是mycoplasma的medium和沒有污染的medium拿一些出來
然後加入定量的DNA下去
incubation一天之後
測看看DNA有沒有被mycoplasma吃掉
這方法還挺快挺簡便的
不過用DAPI染是一個比較準確的方法
--
不管是去哪裡
前進是唯一的方法
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.131.67
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發信人: boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題]細胞培養污染了
發信站: 清華生命科學 BBS (Wed Apr 27 17:35:58 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!nthuls
其實我看過細胞培養的書 裡面有講過所謂的小黑點的確未必是污染
可能是血清中一些成分的聚集
討厭的是拿血清 only 放到 incubator 裡面 "小黑點"還真的會變多
因此更容易被誤認為污染
--
不喜歡的話可以過濾掉
--
莫非定律:
到了期末才會想起期初曾選了一門課卻一直沒去上
補充定律:
拿到成績單才發現上了一學期的課忘了去考期末考
--
※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: ym71010.ym.edu.tw
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發信人: ANUS.bbs@bbs.badcow.com.tw (咦? 肝快爆了! XD), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題]細胞培養污染了
發信站: 不良牛牧場 (Wed Apr 27 18:27:53 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!SimFarm
阿 如果是這樣 那我就被細胞騙好幾次了:Q
※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言：
: 其實我看過細胞培養的書 裡面有講過所謂的小黑點的確未必是污染
: 可能是血清中一些成分的聚集
: 討厭的是拿血清 only 放到 incubator 裡面 "小黑點"還真的會變多
: 因此更容易被誤認為污染
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你是巨大的海洋 我是雨下在妳身上 我失去自己的形狀 我看到遠方 愛情的模樣
曾經孤單的徬徨 曾經相信曾經失望 妳穿過重重的迷惘 那愛的慌張 終於要解放
你是誰 教我狂戀 教我勇敢地挑戰全世界 在一樣的身體裡面 一樣有愛與被愛的感覺
我愛誰 已無所謂 沒有誰能將愛情劃界限 在一樣地身體裡面 迷樣的魔力卻是更強烈
星星在夜空中閃亮 星空下我不停流浪 此生我無知的奔忙 因為你眼光 都化成了光亮
這世界全部的漂亮 不過妳可愛的模樣 妳讓我舉雙手投降 跨出了城牆 長出了翅膀
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作者: SPEman (speman) 看板: Biotech
標題: Re: [問題]細胞培養污染了
時間: Sun May 1 21:50:48 2005
※ 引述《ghjkl (想去加勒比海釣魚)》之銘言：
: ※ 引述《StillRick (事情真多)》之銘言：
: : 用DNA dye，例如Hochest或者DAPI，在400X的倍率下
: : 如果有mycoplasma contamination
: : 會有細胞核以外的小亮點或模糊的亮區。
: 我們的測試方法簡單一點
: 就是把可能是mycoplasma的medium和沒有污染的medium拿一些出來
: 然後加入定量的DNA下去
: incubation一天之後
: 測看看DNA有沒有被mycoplasma吃掉
請問要怎麼看DNA有沒被吃掉呢?
DNA不是無色透明的,顯微鏡也看不到的構造嗎?
還是用結晶紫來染色,看哪一邊染得比較深呢?
: 這方法還挺快挺簡便的
: 不過用DAPI染是一個比較準確的方法
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.58.16