學姊說:Passage的時候,serum沒有沖乾淨到,會抑制trypsin的效果...
why?????
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◆ From: 203.64.247.100
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作者 keku (花前醉臥流蘇帶) 看板 Biotech
標題 Re: [問題] cell culture
時間 Thu Dec 16 18:06:46 2004
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※ 引述《ymyusan ()》之銘言：
: 學姊說:Passage的時候,serum沒有沖乾淨到,會抑制trypsin的效果...
: why?????
有點看不懂你寫的中文...? 妳是說一開始wash掉舊medium的步驟嗎？
若是的話 因為medium裡本身就有許多保護細胞外層的東西之故
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◆ From: 140.109.214.254
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作者 eriel.bbs.@bbs.life.nchu.edu.tw (C'est), 看板 Biotech
標題 Re: [問題] cell culture
時間 LIFE (Fri Dec 17 04:11:27 2004)
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※ 引述《keku.bbs@ptt.cc (花前醉臥流蘇帶)》之銘言：
> ※ 引述《ymyusan ()》之銘言：
> : 學姊說:Passage的時候,serum沒有沖乾淨到,會抑制trypsin的效果...
> : why?????
> 有點看不懂你寫的中文...? 妳是說一開始wash掉舊medium的步驟嗎？
> 若是的話 因為medium裡本身就有許多保護細胞外層的東西之故
我聽到的說法是：培養基中的FBS胎牛血清會中和trypsin酵素的作用
因此要用PBS去沖洗一下，這樣trypsin的切除效果才會顯著
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不知是不是真的如此？
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└┘ Author: eriel 從 140.116.144.209 發表
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作者 boyo (29大頭) 看板 Biotech
標題 Re: [問題] cell culture
時間 Thu Dec 16 20:34:20 2004
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※ 引述《keku (花前醉臥流蘇帶)》之銘言：
: ※ 引述《ymyusan ()》之銘言：
: : 學姊說:Passage的時候,serum沒有沖乾淨到,會抑制trypsin的效果...
: : why?????
: 有點看不懂你寫的中文...? 妳是說一開始wash掉舊medium的步驟嗎？
: 若是的話 因為medium裡本身就有許多保護細胞外層的東西之故
trypsin本身是打斷一些extracellular matrix的鍵結
serum裡面有些protein本身就會跟trypsin combine到
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如果孔子是那待沽的玉
我便是待斟的酒
用一生的時間 蘊釀自己的濃度
只為等待剎那的傾注
張曉風 釀酒的理由
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作者 mintting (過境候鳥) 看板 Biotech
標題 Re: [問題] cell culture
時間 Sat Dec 18 00:27:08 2004
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最常用來subculture的兩種溶液為trypsin和EDTA
(頑強的細胞只好用scraper @@")
trypsin主要作用是分解細胞與基質表面的附著蛋白
EDTA為chelating agent,可以去除二價鈣鎂離子
serum內因為含有trypsin inhibitor和鈣鎂離子
所以可以抑制和降低trypsin和EDTA的活性
故加入trypsin-EDTA前要先用HBSS或PBS將serum洗去
而在trypsin作用後則要迅速加入含有serum的medium
※ 引述《ymyusan ()》之銘言：
: 學姊說:Passage的時候,serum沒有沖乾淨到,會抑制trypsin的效果...
: why?????
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