推 boyo:要放在養菌的incubator啊 203.73.144.27 02/12
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: ANUS.bbs@bbs.badcow.com.tw (白 色 蛋 塔), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] cell-culture
發信站: 不良牛牧場 (Fri Feb 11 22:40:43 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost
:Q 我之前挑了兩個月的stable selection 也掛光了
唉 Orz
※ 引述《iceoo.bbs@ptt.cc (後方cos77度角襲捲而來)》之銘言：
: ※ 引述《ymyusan ()》之銘言：
: : 請教各位前備:
: : 小弟最近在琣養細胞,可是一直遇到一些問題...
: : 之前看到有人談到細胞污染的事情,那時我跟好也有
: : 一些相關的問題,但是狀況有些不同,之前那位網友
: : 談到說:發現到細胞旁邊有一點一點的小黑點,許多網友
: : 覺得是細菌污染.但是我最近在養細胞時,發現到細胞
: : 旁邊出現一些怪怪的東西...
: : 特徵如下:
: 我之前用RPMI養B cell也有類似的狀況 本來都胖胖圓圓的很健康
: 莫名其妙就變成不規則形 而且有apotosis的狀況 medium是有點
: 變濁 但到底有沒有污染眾說紛紜 最後老闆就叫我倒掉重作
: 看他好像也不懂 我有點不服 而且我又養了一個多月了 心裡很不爽
: 我做那麼辛苦 他隨便一句話就叫要倒掉 但後來還是倒掉了
: 省得要是實驗室大污染算到我頭上就麻煩了 想來還是很不甘願
: : size大約只有細胞的十分之一
: : 發現到有越來越的情況,但是ㄟ..不知道是不是太久沒換
: : medium,讓細胞死掉,死亡的細胞殘骸,越來越多....
: : 顏色:有點透明...
: : 換完medium之後,過一天medium就呈現肉湯狀(稠稠ㄉ)
: : 而且飄起來的細胞,越來越多...
: : 請問一下各位前輩,這樣算是污染嗎????
: : 另外,我要怎麼知道我是受到什麼污染???...
: : 有什麼資訊(網路or 書籍),可以幫我解決這類的問題...
: : 感激不進~~~~~~~~
--
★ ☆ / ★ ☆
/ / ★ / ☆ /
★ ☆ ★ ☆ ★ ☆
你是巨大的海洋 我是雨下在妳身上 我失去自己的形狀 我看到遠方 愛情的模樣
曾經孤單的徬徨 曾經相信曾經失望 妳穿過重重的迷惘 那愛的慌張 終於要解放
你是誰 教我狂戀 教我勇敢地挑戰全世界 在一樣的身體裡面 一樣有愛與被愛的感覺
我愛誰 已無所謂 沒有誰能將愛情劃界限 在一樣地身體裡面 迷樣的魔力卻是更強烈
星星在夜空中閃亮 星空下我不停流浪 此生我無知的奔忙 因為你眼光 都化成了光亮
這世界全部的漂亮 不過妳可愛的模樣 妳讓我舉雙手投降 跨出了城牆 長出了翅膀
--
╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮
│ ↘ Welcome to SimFarm BBS -- From : [220.139.86.38] │
╰◣◣◢ ◢◢《不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo》 ◣◣◢ ─╯
> -------------------------------------------------------------------------- <
發信人: zenosin.bbs@bbs.badcow.com.tw (zenosin), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] cell-culture
發信站: 不良牛牧場 (Sat Feb 12 12:10:39 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost
※ 引述《iceoo.bbs@ptt.cc (後方cos77度角襲捲而來)》之銘言：
: ※ 引述《ymyusan ()》之銘言：
: : 請教各位前備:
: : 小弟最近在琣養細胞,可是一直遇到一些問題...
: : 之前看到有人談到細胞污染的事情,那時我跟好也有
: : 一些相關的問題,但是狀況有些不同,之前那位網友
: : 談到說:發現到細胞旁邊有一點一點的小黑點,許多網友
: : 覺得是細菌污染.但是我最近在養細胞時,發現到細胞
: : 旁邊出現一些怪怪的東西...
: : 特徵如下:
: 我之前用RPMI養B cell也有類似的狀況 本來都胖胖圓圓的很健康
: 莫名其妙就變成不規則形 而且有apotosis的狀況 medium是有點
: 變濁 但到底有沒有污染眾說紛紜 最後老闆就叫我倒掉重作
: 看他好像也不懂 我有點不服 而且我又養了一個多月了 心裡很不爽
: 我做那麼辛苦 他隨便一句話就叫要倒掉 但後來還是倒掉了
: 省得要是實驗室大污染算到我頭上就麻煩了 想來還是很不甘願
根據經驗，這是最省事的作法
污染是常有、很難完全避免的事
與其花時間在與實驗目的不相關的地方上
倒不如趕快重新作
: : size大約只有細胞的十分之一
: : 發現到有越來越的情況,但是ㄟ..不知道是不是太久沒換
: : medium,讓細胞死掉,死亡的細胞殘骸,越來越多....
: : 顏色:有點透明...
: : 換完medium之後,過一天medium就呈現肉湯狀(稠稠ㄉ)
: : 而且飄起來的細胞,越來越多...
: : 請問一下各位前輩,這樣算是污染嗎????
: : 另外,我要怎麼知道我是受到什麼污染???...
: : 有什麼資訊(網路or 書籍),可以幫我解決這類的問題...
: : 感激不進~~~~~~~~
--
╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮
│ ↘ Welcome to SimFarm BBS -- From : [218.162.89.54] │
╰◣◣◢ ◢◢《不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo》 ◣◣◢ ─╯
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: ineine (ineine) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] cell-culture
時間: Sun Feb 13 10:27:33 2005
※ 引述《zenosin.bbs@bbs.badcow.com.tw (zenosin)》之銘言：
: ※ 引述《iceoo.bbs@ptt.cc (後方cos77度角襲捲而來)》之銘言：
: : 我之前用RPMI養B cell也有類似的狀況 本來都胖胖圓圓的很健康
: : 莫名其妙就變成不規則形 而且有apotosis的狀況 medium是有點
: : 變濁 但到底有沒有污染眾說紛紜 最後老闆就叫我倒掉重作
: : 看他好像也不懂 我有點不服 而且我又養了一個多月了 心裡很不爽
: : 我做那麼辛苦 他隨便一句話就叫要倒掉 但後來還是倒掉了
: : 省得要是實驗室大污染算到我頭上就麻煩了 想來還是很不甘願
: 根據經驗，這是最省事的作法
: 污染是常有、很難完全避免的事
: 與其花時間在與實驗目的不相關的地方上
: 倒不如趕快重新作
如果medium變渾濁，那一定是污染!
沒有污染的meidum通常都是澄清的，不過顏色會因為酸鹼值不同而改變。
遇到污染處理最好的方法，就是趕快把medium倒掉，
(前提是這個cell line不是非常非常重要)
記得別用culture room的suction去吸，
因為你會把污染的medium留在culture room中，
把他拿出來culture room，加上一點漂白水去處理再到掉。
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.229.15.21
> -------------------------------------------------------------------------- <
作者: iceoo (後方cos77度角襲捲而來) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] cell-culture
時間: Sun Feb 13 10:50:05 2005
※ 引述《ineine (ineine)》之銘言：
: ※ 引述《zenosin.bbs@bbs.badcow.com.tw (zenosin)》之銘言：
: : 根據經驗，這是最省事的作法
: : 污染是常有、很難完全避免的事
: : 與其花時間在與實驗目的不相關的地方上
: : 倒不如趕快重新作
: 如果medium變渾濁，那一定是污染!
: 沒有污染的meidum通常都是澄清的，不過顏色會因為酸鹼值不同而改變。
: 遇到污染處理最好的方法，就是趕快把medium倒掉，
: (前提是這個cell line不是非常非常重要)
: 記得別用culture room的suction去吸，
: 因為你會把污染的medium留在culture room中，
: 把他拿出來culture room，加上一點漂白水去處理再到掉。
這些基本處理是一定要的 不過medium變渾濁(稍微濁而已)
可能是細胞長太多 或者是medium換的不夠頻繁 導致細胞死亡
也可能是CO2 incubator 濃度不對 我用顯微鏡看也沒看到明顯的
yeast or something 我想不能那麼武斷的說是污染 只是為了保險
沒有那麼多時間去深究而已
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 59.112.80.190
推 oplz:CO2 濃度不對為甚麼 medium 會變濁??134.174.178.197 02/13
推 jinmaw:有很多東西顯微鏡是看不到的 61.230.34.8 02/13
推 chiuj:CO2濃度太高或太低改變的只有medium顏色 218.174.60.11 02/13
→ chiuj:CO2濃度和混不混濁一點關係也沒有; 可以試試把 218.174.60.11 02/13
→ chiuj:incubator開到10% CO2; 把新鮮medium裝入蓋子有 218.174.60.11 02/13
→ chiuj:0.2um濾膜的flask中, 看到底是顏色變還是turbility 218.174.60.11 02/13
→ chiuj:前提是medium不能污染(CO2只改變pH) 218.174.60.11 02/13
→ chiuj:另外，細胞長太多也不會使medium變混濁 218.174.60.11 02/13
→ chiuj:細胞代謝產物改變的仍是pH; medium仍應保持澄清 218.174.60.11 02/13
→ chiuj:除非發生cell大量死亡,才有可能看起來混濁 218.174.60.11 02/13
推 aggaci:是嗎???我養過HL60 K562只要細胞多了點 就會混濁140.114.100.165 02/13
→ aggaci:但是我就顯微鏡來看 細胞都很健康 沒污染阿!140.114.100.165 02/13
→ aggaci:但貼盤性細胞的話 medium混濁=>99% 污染140.114.100.165 02/13
推 chiuj:Please refer 2193 61.229.171.93 02/14