推 aggaci:打破細胞前 總得先離心吧?140.114.100.165 04/16
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作者: HIbaby (嗨北鼻) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] western blotting 收細胞方法
時間: Sat Apr 16 20:32:55 2005
※ 引述《saviora (颶風之翼)》之銘言：
: ※ 引述《himali.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (雷古多 呼)》之銘言：
: : 之前我們學姊是說
: : 因為是要跑WESTERN 就是要把細胞打破
: : 所以我們都是typsin作用一下之後
: : 再用刮的 反正收乾淨就對了..
: 請問可以請教一個問題嗎
: 如果細胞破裂 那裡面的protein要怎麼抵抗trypsin
我門實驗室會用含1%血清的PBS洗過 用trypsin回收下來的細胞
在進行細胞的lysis
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◆ From: 219.1.156.27
請問一下大家都用刮的還是用trypsin打下來 這樣跑出來的結果會有差嗎?
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◆ From: 61.31.137.63
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作者: baby1312 (唷呼) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] western blotting 收細胞方法
時間: Mon Mar 28 01:40:09 2005
※ 引述《cuteball (加油唷)》之銘言：
: 請問一下大家都用刮的還是用trypsin打下來 這樣跑出來的結果會有差嗎?
我個人的結果是沒有差
不過用刮的有些細胞貼很緊
會刮不太下來
可能收集到的細胞數就不夠
我看過有先用TRYPSIN再用刮的
一網打盡喔~~
--
有空多交流嘿...
http://home.pchome.com.tw/personal/baby1312/
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◆ From: 218.169.58.210
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發信人: Rebeca.bbs@perl.tcu.edu.tw (恰北北), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] western blotting 收細胞方法
發信站: Perl (Mon Mar 28 09:35:10 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!Perl
※ 引述《baby1312.bbs@ptt.cc (唷呼)》之銘言：
: ※ 引述《cuteball (加油唷)》之銘言：
: : 請問一下大家都用刮的還是用trypsin打下來 這樣跑出來的結果會有差嗎?
: 我個人的結果是沒有差
: 不過用刮的有些細胞貼很緊
: 會刮不太下來
: 可能收集到的細胞數就不夠
: 我看過有先用TRYPSIN再用刮的
: 一網打盡喔~~
我們是用trypsin打下來 在用刮的
可是trypsin不要作用太久(會傷細胞)
我也覺得沒差 又搞剛^^
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╦═╮ Origin:
╬═╯ 作者來自 140.109.40.11
╩ｅｒｌ 蔚藍海岸 perl.tcu.edu.tw (203.64.80.217)
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作者: kismet (Lydia) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] western blotting 收細胞方法
時間: Thu Mar 31 20:30:47 2005
※ 引述《cuteball (加油唷)》之銘言：
: 請問一下大家都用刮的還是用trypsin打下來 這樣跑出來的結果會有差嗎?
如果不想浪費trypsin就用刮的.....
如果有部分細胞是還要subculture繼續養 我就會用trypsin
如果細胞是全部都要拿來跑 western.....我會用刮的.....
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.166.211.203
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發信人: himali.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (雷古多 呼), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] western blotting 收細胞方法
發信站: 夢之大地 (Sat Apr 16 17:57:06 2005)
轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!Dream
之前我們學姊是說
因為是要跑WESTERN 就是要把細胞打破
所以我們都是typsin作用一下之後
再用刮的 反正收乾淨就對了..
※ 引述《Rebeca.bbs@perl.tcu.edu.tw (恰北北)》之銘言：
> ※ 引述《baby1312.bbs@ptt.cc (唷呼)》之銘言：
> : 我個人的結果是沒有差
> : 不過用刮的有些細胞貼很緊
> : 會刮不太下來
> : 可能收集到的細胞數就不夠
> : 我看過有先用TRYPSIN再用刮的
> : 一網打盡喔~~
> 我們是用trypsin打下來 在用刮的
> 可是trypsin不要作用太久(會傷細胞)
> 我也覺得沒差 又搞剛^^
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夢之大地 逼逼ㄟ四 █▁◤ █ █ █▁▁ █ █ ▉▉▉ █▁ █ █ █ █ █▁◤
※ Origin: <bbs.ccns.ncku.edu.tw> ◆ From: CE36169.civil.ncku.edu.tw
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作者: saviora (颶風之翼) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] western blotting 收細胞方法
時間: Sat Apr 16 18:57:04 2005
※ 引述《himali.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (雷古多 呼)》之銘言：
: 之前我們學姊是說
: 因為是要跑WESTERN 就是要把細胞打破
: 所以我們都是typsin作用一下之後
: 再用刮的 反正收乾淨就對了..
: ※ 引述《Rebeca.bbs@perl.tcu.edu.tw (恰北北)》之銘言：
: > 我們是用trypsin打下來 在用刮的
: > 可是trypsin不要作用太久(會傷細胞)
: > 我也覺得沒差 又搞剛^^
:
請問可以請教一個問題嗎
如果細胞破裂 那裡面的protein要怎麼抵抗trypsin
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◆ From: 218.175.173.164