推 anubis0703:太過稀釋?!我是1000倍稀釋這樣會太過嗎...>"<謝謝你唷! 11/30 16:58
推 hal:我也近千倍稀釋不過我的TPA的原先濃度是160μM加到5cc medium 11/30 17:39
→ anubis0703:嗯嗯我會再試試看滴，謝謝你<(_ _)> 11/30 18:01
大家好<(_ _)>小女子不才想請教一下各位大大，
我現在在培養U937(不知道有沒有人有經驗)
因為想用TPA分化細胞，但是分化兩三次了，
過了三天都沒有任何變化(只有細胞貼附上去)。
實驗室的學長同樣的方法也都有效分化，
後來問過，唯一的差別只有我有先離心換新的medium但是他是直接加入TPA，
然後我和學長用一樣的步驟，
今天中午剛好12Hr，剛剛去看，是只有貼上去的樣子(但是死了一堆= =)
基本上我學長是說12小時其實已經開始有部份會分化完成了，
不知道我的為什麼沒辦法分化>"<
想請問一下有人有相同的經驗嗎???
PS 刺激的藥量是5 nM以及10 nM...
想請各位有經驗的前輩們給予指教，謝謝囉:)
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作者: hal (Acer NB 使用中...) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 想請問有關細胞培養...
時間: Wed Nov 30 16:01:12 2005
※ 引述《anubis0703 (阿筠兒)》之銘言：
: 大家好<(_ _)>小女子不才想請教一下各位大大，
: 我現在在培養U937(不知道有沒有人有經驗)
: 因為想用TPA分化細胞，但是分化兩三次了，
: 過了三天都沒有任何變化(只有細胞貼附上去)。
: 實驗室的學長同樣的方法也都有效分化，
: 後來問過，唯一的差別只有我有先離心換新的medium但是他是直接加入TPA，
: 然後我和學長用一樣的步驟，
: 今天中午剛好12Hr，剛剛去看，是只有貼上去的樣子(但是死了一堆= =)
: 基本上我學長是說12小時其實已經開始有部份會分化完成了，
: 不知道我的為什麼沒辦法分化>"<
: 想請問一下有人有相同的經驗嗎???
: PS 刺激的藥量是5 nM以及10 nM...
我的狀況是用hl-60
下的藥也是TPA
我兩種方法都有用過不管有沒有先換medium
對hl-60都可以貼的很好
不過我用的藥量是32nM而也有paper用到160nM的量
12小時後便貼的很明顯24-48小時幾乎全貼
還有TPA反覆解凍的話會有問題會沒法引起分化
還有TPA太過稀釋也是會有問題的
希望以上能有小小幫助
: 想請各位有經驗的前輩們給予指教，謝謝囉:)
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