我養的細胞是hepatoma cell line Huh7
而細胞養著養著...
出現了許多泡泡的現象...
也是所謂的autophagy...
這是代表細胞不健康了嘛?
不過如果正常的繼代...按時加入medium...
這種現象也沒辦法消失...
老師覺得可以用96 well將沒有autophagy的cell挑出...
再放大....而我是怕有clonal effect...
不知道大家有什麼建議...謝謝^^""
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◆ From: 221.169.193.230
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作者: vacule (活力拿出來!) 看板: Biotech
標題: Re: 有關細胞autophagy的問題
時間: Fri Dec 30 19:46:36 2005
※ 引述《lentivirus ()》之銘言：
: 我養的細胞是hepatoma cell line Huh7
: 而細胞養著養著...
: 出現了許多泡泡的現象...
: 也是所謂的autophagy...
: 這是代表細胞不健康了嘛?
: 不過如果正常的繼代...按時加入medium...
: 這種現象也沒辦法消失...
: 老師覺得可以用96 well將沒有autophagy的cell挑出...
: 再放大....而我是怕有clonal effect...
: 不知道大家有什麼建議...謝謝^^""
如果你的Huh7沒有transfect gene 那何不重新解凍呢?
很多細胞subculture太多代之後 就會有很多泡泡在裡面 應該救不回來
還是您的medium 忘了加serum? 所以他們長久處於 stravation情況下
用96 well 挑出沒有泡泡的cell 那是很麻煩的事情唷..
1 well 種 1 cell 嗎? 然後你還要等他變多...挖...很辛苦呢..
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◆ From: 140.112.133.48
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作者: lentivirus () 看板: Biotech
標題: Re: 有關細胞autophagy的問題
時間: Sat Dec 31 00:37:42 2005
※ 引述《vacule (活力拿出來!)》之銘言：
: ※ 引述《lentivirus ()》之銘言：
: 如果你的Huh7沒有transfect gene 那何不重新解凍呢?
: 很多細胞subculture太多代之後 就會有很多泡泡在裡面 應該救不回來
: 還是您的medium 忘了加serum? 所以他們長久處於 stravation情況下
: 用96 well 挑出沒有泡泡的cell 那是很麻煩的事情唷..
: 1 well 種 1 cell 嗎? 然後你還要等他變多...挖...很辛苦呢..
其實這個細胞是後來向別的老師要來的.....
也是人家解凍後用flask給我的....
因此我也沒辦法再拿到新的細胞株.....
基本應該是別人給我的細胞已經不健康了.....
有試過一些離心的方法試著來救...不過好像都不管用....
anyway....謝謝你的建議囉^^""
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◆ From: 59.104.34.211
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作者: machin (從此相思與君絕) 看板: Biotech
標題: Re: 有關細胞autophagy的問題
時間: Sun Jan 1 18:24:56 2006
※ 引述《lentivirus ()》之銘言：
: 其實這個細胞是後來向別的老師要來的.....
: 也是人家解凍後用flask給我的....
: 因此我也沒辦法再拿到新的細胞株.....
那你拿到別人給的細胞時,是否就應該先凍一些起來?
我待的幾間實驗室的習慣都是:
拿到新的細胞株 無論如何先養滿凍幾管起來
不然實驗失敗了 還要跟別人要 花時間又要麻煩人家
: 基本應該是別人給我的細胞已經不健康了.....
: 有試過一些離心的方法試著來救...不過好像都不管用....
: anyway....謝謝你的建議囉^^""
我也養過幾種不同來源的Huh7
其中一種是不論怎麼養 細胞就是長的不漂亮
好像就是你所謂的autophagy的情形
不曉得是不是跟這個細胞株的來源有關
所以你要不要問看看給你細胞株實驗室呀?
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幸福有得買嗎？
如果有，
請告訴我幸福哪裡買。
我想要買幸福。
誰能賣我幸福？
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◆ From: 219.87.216.42
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作者: lentivirus () 看板: Biotech
標題: Re: 有關細胞autophagy的問題
時間: Sun Jan 1 19:18:04 2006
※ 引述《machin (從此相思與君絕)》之銘言：
: ※ 引述《lentivirus ()》之銘言：
: 那你拿到別人給的細胞時,是否就應該先凍一些起來?
: 我待的幾間實驗室的習慣都是:
: 拿到新的細胞株 無論如何先養滿凍幾管起來
: 不然實驗失敗了 還要跟別人要 花時間又要麻煩人家
恩恩...我知道要這樣子做....
不過來源的細胞原本就有autophagy了...
後來打老鼠想建立tumor growth curve 也長不出來
有向原本的實驗室check過了....
應該是那一批Huh-7細胞都有問題了...^^""
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◆ From: 59.104.34.116