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請問有人做過kupffer cell primary culture嗎? 我參照其它paper的protocol分離下來的細胞量並不理想 我的方法是先將大鼠肝臟以生理食鹽水灌流去除紅血球 接著再將肝臟取下來以 PBS + collagenase IV游離細胞 (也有其他paper是將collagenase IV灌入肝臟分解 何種較好?) 將游離的細胞離心去除其他組織碎屑後 放入percoll分離細胞(想請問有人熟悉用法嗎?) 最後分離下來的細胞也沒有很明顯的分層 想請問是否是離心的轉速及時間太短(400g 20min) 如果有人做過kupffer cell primary culture 可以傳授一下經驗嗎? 謝謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.174.136
runpapa0520:http://0rz.tw/802Uk 你可以參考下 08/15 22:42
runpapa0520:細胞懸浮液要非常緩慢延管壁加到percoll上 分層才會好 08/15 22:44
runpapa0520:根據這篇 分到10*7的細胞 不是問題 08/15 22:47
aken740127:謝謝大大 可是我沒有辦法下載這一篇... 08/17 10:14
aken740127:可不可以寄到我的信箱? 謝謝 aken740127@yahoo.com.tw 08/17 10:15
runpapa0520:已寄 08/18 10:07
aken740127:感激不盡!! 08/19 02:15