※ 引述《DouglasT (sdf)》之銘言:
: 我也做過一些bone section immunostain,
: 我也碰過你的問題,而且殘存的section 就算有染上,也不能照相。
: 我沒真的測試過,但我覺得很多CD marker 對福馬林類的fix 都很不耐,
: 就算antigen retrieval 沒掉片也染不出來。
: 我後來用frozen section,同時參考別的paper 用膠帶法,掉片的問題就解決了。
: 同時我也不用福馬林類做fix ,是採用fresh bone secton,
: 在染之前用EtOH 或Acetone 短暫fix ,很多染不出來的CD marker 都活回來了,
: 不是CD marker 的antigen 他們的intensity 也會變強,
: 效果顯著。
: 你可以參考一下。
又多了一個人來討論這個困擾人的問題了~XD
進入主題!!
想請問你是觀察骨頭的哪個部份呢?
我之前有嘗試過frozen section,就是用OCT包埋切片,不過這樣的方法,會發現
我要觀察的細胞,osteoblast跟osteoclast都脫離我的骨頭表面,就是會漂到
bone marrow 中間,如果這樣以形態來說,就會變的沒有說服力,後來我們才用
paraffin section。
另外想請問你,使用fresh bone section的話,是直接將骨頭取下,不灌流固定,
直接切片,那這樣的話刀片不就要用鋼刀之類的刀片。>""<
還有就是膠帶法~第一次聽到這樣的方法,可以跟我說一下這是什麼方法嗎?
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