[問題] 用MTT assay測藥物對細胞毒殺

[bluewewe (我愛火影啦)]

想請問一下

如果在測藥物(5-FU) 對細胞的IC50時

作用時間是72hr

(1)需要每天換medium嗎? 具學姊說這樣是為了維持每天藥物濃度相同

但是這樣同時也會容易造成誤差 (小弟已經失敗三次)

不知道 各位之前有做過相關的前輩 會不會每天換medium呢?

另外
(2)測MTT OD值時,如果只用單一波長測(也就是沒有reference wavelengh)

對結果會影響大嗎?

(3) RPMI1640 中的phenol red 好像會對MTT造成影響 為什麼?

謝謝大家

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 163.15.178.11
推 isotoper:通常我換藥是避免藥物被氧化而失去作用,要看藥的特性吧
推 sakuru:我之前做也有每天換，不過我不是做藥物相關的實驗..
→ sakuru:2. 我用invitrogen的MTT kit 也只量單一波長阿
→ sakuru:但是要記得做blank，應該沒問題
推 borhen:3==> 是顏色的關係
推 bluewewe:謝謝大家的回答^^
推 picar:我都沒換－－細胞浮起來怎麼辦？
推 chiuj:每種細胞不相同，通常seeding後五天內都不需要換
→ chiuj:growth curve還可以保持良好線性