Re: [問題] 測Cell cycle的結果

[nation (^^)]

  bcl-2有down-regulation, P53沒變化不能推論是bcl-2的變話引發apoptosis
  除非overexpress bcl-2可以rescue絕大多數的細胞,使之在藥物作用下
  不會再發生apoptosis的話,
  才能宣稱apoptosis是因為藥物down-regulate bcl-2而發生

  flow cytometry的結果利用ModFitLT來分析的話
  是可以大略判斷有沒有apoptosis

  但是不是看G2/M的peak有沒有改變
  是看沒有整套DNA(dipoid)的部分
  不過沒有辦法完全量化apoptosis的程度
  稱為assessing apoptosis by detection of sub-diploid population

  要判斷apoptosis的程度
  應該用標準的幾種方法:

  1)Annexin V binding
  2)caspase 3 activity assay
  3)TUNEL assay

  此外,影響Bcl-2, 不代表不會影響Bax, Bim, Bak, Bcl-XL
  Apoptosis不是Bcl-2一個分子決定
  往往是看各分子間的比例和平衡

  因此必需用overexpression/knockdown來驗證假設

※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言：
我現在在念一篇paper

裡面有做到分析cell cycle 用PI染DNA

跑Flow 會看到 G0/G1 S G2/M的peak

我以前學過tumor cell會有非整數倍體出現

所以G2/M和G0/G1的比值不會接近二

但PAPER上用藥物處理的細胞 他的G2/M peak比沒有加藥的control組高一倍

推論為發生apoptosis 走bcl-2的路徑

這是什麼道理呢?

煩請先進教導 謝謝!



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 Digest those memories of him from my heart with trypsin,

           and store in LN2 bottle forever.

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◆ From: 61.62.195.21
推 borhen:cell cycle無法判斷他死亡的路徑= =只能跟你說細胞的狀態
→ borhen:必須搭配其他結果才能判斷
推 tirecake:忘了說 Bcl2是作者用western測出的
推 tirecake:western做bcl2有"down-regulation" p53沒變化
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