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※ 引述《skenzo.bbs@ptt.cc (好冷的天氣)》之銘言: : 我要利用flow偵測細胞的ROS : 先用H2O2 treat cell : 再用DCFHDA避光染色30分鐘 : 想請問有經驗的板友 : 1.需要收MEDIUM的細胞嗎? ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 也許要先考慮你的實驗要看的對象..如果是想看早期的訊號變化.. 那對像是否是收attached cell較合理...通常收飄起來的cell看到的 結果都比較晚期了(ex. apoptosis...), anyway, it depends on your rationale. : 2.第一次做(時間3小時 H2O2濃度是 100 200 400 microM ) : 發現處理組與control組沒差異 那是處理時間要延長嗎? ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 就我所知.. H2O2產生ROS造成DNA damage的訊號很快..也許抓更早的時間點看看 H2O2 reagent是否ok? -- ╭──── Origin:<不良牛牧場> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ Welcome to SimFarm BBS -- From : [211.76.173.247] ◣◣◢ ◢◢不良牛免費撥接→電話:40586000→帳號:zoo→密碼:zoo ◣◣─╯
spunka:我以前做有時是刺激30min 有時是1hr,三小時好像長了點!? 08/22 15:42