推 haleywen:1.試試用pEGFP-f 2.fix:50%EtOH 20min 05/25 21:40
我的細胞會表現EGFP 因為我染PI(propidium iodide)想要看cell cycle
希望看得是有表現EGFP的細胞
我原本是照PI的protocol利用EtOH固定 結果跑flow時完全偵測不到EGFP
跟學長討論的結論是可能酒精會影響EGFP表現
想問問各位前輩們 我要做PI染色可以用paraformaldehyde固定嗎？
另外我想再問關於flow的問題
我們學校那台flow共有三個濾片 FL1 FL2 FL3
看EGFP是用FL1 我查了一下emission在508nm
看PI 用FL3 PI emission在620nm 但是PI + DNA 約在514nm
那這兩個會不會影響到呢？ 需不需要做互補？
很多問題.......麻煩大家了
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