推 hkaiwei:25% 01/27 10:18
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作者: freshing (hold on ~~) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 請問用TCA沈澱protein
時間: Sat Jan 27 17:34:13 2007
※ 引述《a64toto (智勝掀獅)》之銘言:
: 請問一下各位都是用多少%的TCA沈澱protein
: 加的體積又是多少呢?
: TCA買來不是固體的嗎?
我是以 final 10% 來做沈澱
至於加的體積就視你的TCA濃度而定。
以我的操作為例,我是配 20% 的TCA
所以和 sample 就是以 1:1 的比例混在一起。
PS: TCA買來是固體沒錯,小心不要開太久,會受潮 :)
--
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◆ From: 140.120.131.20
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作者: raiden31 (雨中的薑花香) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 請問用TCA沈澱protein
時間: Sat Jan 27 17:44:00 2007
※ 引述《freshing (hold on ~~)》之銘言:
: ※ 引述《a64toto (智勝掀獅)》之銘言:
: : 請問一下各位都是用多少%的TCA沈澱protein
: : 加的體積又是多少呢?
: : TCA買來不是固體的嗎?
: 我是以 final 10% 來做沈澱
: 至於加的體積就視你的TCA濃度而定。
: 以我的操作為例,我是配 20% 的TCA
: 所以和 sample 就是以 1:1 的比例混在一起。
: PS: TCA買來是固體沒錯,小心不要開太久,會受潮 :)
使用方法和f大相同
20%TCA和sample 1:1 混合
TCA買來時是固體,保存在2-8度
除了擔心受潮問題外
另外TCA吸入會造成傷害
故買來時,先放至室溫,再打開使用
以免一打開時,內外空氣溫差大,裡面的一些粉末隨著空氣散出
也盡量避免吸入
--
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◆ From: 124.8.28.146
推 pacity:我習慣一買來的TCA就全部溶成100% (w/v) 還蠻方便的 01/30 12:34
→ pacity:這樣就沒有受潮的問題了~~ 01/30 12:36
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作者: freshing (hold on ~~) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 請問用TCA沈澱protein
時間: Sun Jan 28 12:05:33 2007
※ 引述《a64toto (智勝掀獅)》之銘言:
: 那請問最後Acetone加的量是多少呢?
如果是利用 acetone 來做沈澱的話
我的作法是以 final 20% 來做沈澱
所以就是 acetone 和 sample 以 1:4 來操作
加完以後丟到 -80度 幫助沈澱
: 如果我的sample有100 ml
: 那20%的TCA就要加100 ml對嗎?
TCA 沈澱是這樣做沒錯 ( 100ml很多耶 @@" )
: ※ 引述《raiden31 (雨中的薑花香)》之銘言:
: : 使用方法和f大相同
: : 20%TCA和sample 1:1 混合
: : TCA買來時是固體,保存在2-8度
: : 除了擔心受潮問題外
: : 另外TCA吸入會造成傷害
: : 故買來時,先放至室溫,再打開使用
: : 以免一打開時,內外空氣溫差大,裡面的一些粉末隨著空氣散出
: : 也盡量避免吸入
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◆ From: 140.120.131.20