推 vmp:換新的running buffer試試看(上下都要換) 218.35.20.159 01/18
推 ccsu:樣品鹽濃度過高有時也會這樣, check看看.. 218.160.35.155 01/19
推 pinkicat:sample有沒加gllycerol 210.68.28.176 01/21
推 pinkicat:sample多大 gel是配幾%的 210.68.28.176 01/21
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 ccdd.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (................), 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 夢之大地 (Thu Jan 20 12:23:35 2005)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
───────────────────────────────────────
※ 引述《GINPAY.bbs@ptt.cc》之銘言：
> 最近跑SDS PAGE
> 頑固的sample 死也不stacking
> 按照molecular cloing 上配方
> 1.0M Tris(pH6.8) 已經確認過了 還是沒辦法
> 每個well sample diffuse成一團進入 seperating gel
> 請問還有什麼地方我沒注意到的?
之前我也有出現同樣的問題
後來發現是架gel的10%APS出了問題
我想你能要check你架gel的所有的buffer
看看有沒有問題
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夢之大地 逼逼ㄟ四 █▁◤ █ █ █▁▁ █ █ ▉▉▉ █▁ █ █ █ █ █▁◤
※ Origin: <bbs.ccns.ncku.edu.tw> ◆ From: 140.116.94.59
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 jeanie.bbs@bbs.ym.edu.tw (給我好天氣..), 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 陽明大學神農坡資訊站 (Thu Jan 20 12:59:23 2005)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
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※ 引述《GINPAY.bbs@ptt.cc》之銘言：
> 最近跑SDS PAGE
> 頑固的sample 死也不stacking
> 按照molecular cloing 上配方
> 1.0M Tris(pH6.8) 已經確認過了 還是沒辦法
> 每個well sample diffuse成一團進入 seperating gel
> 請問還有什麼地方我沒注意到的?
Running buffer確認過沒問題了嗎？
pH很重要哦！
--
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※ Origin: 陽明神農坡 <bbs.ym.edu.tw> ◆ From: 140.129.75.251
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 ccdd.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (................), 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 夢之大地 (Thu Jan 20 13:43:15 2005)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
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※ 引述《jeanie.bbs@bbs.ym.edu.tw (給我好天氣..)》之銘言：
> ※ 引述《GINPAY.bbs@ptt.cc》之銘言：
> > 最近跑SDS PAGE
> > 頑固的sample 死也不stacking
> > 按照molecular cloing 上配方
> > 1.0M Tris(pH6.8) 已經確認過了 還是沒辦法
> > 每個well sample diffuse成一團進入 seperating gel
> > 請問還有什麼地方我沒注意到的?
> Running buffer確認過沒問題了嗎？
> pH很重要哦！
running buffer的pH值要多少ㄋ
我從來都沒有調過ㄝ
可是跑到現在也沒有什麼問題
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夢之大地 逼逼ㄟ四 █▁◤ █ █ █▁▁ █ █ ▉▉▉ █▁ █ █ █ █ █▁◤
※ Origin: <bbs.ccns.ncku.edu.tw> ◆ From: 140.116.94.59
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 aggaci (五子棋啦) 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 Thu Jan 20 16:45:01 2005
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※ 引述《ccdd.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (................)》之銘言：
: ※ 引述《jeanie.bbs@bbs.ym.edu.tw (給我好天氣..)》之銘言：
: > Running buffer確認過沒問題了嗎？
: > pH很重要哦！
: running buffer的pH值要多少ㄋ
: 我從來都沒有調過ㄝ
: 可是跑到現在也沒有什麼問題
我也沒調過
跑出來非常的好看!
所以我覺得running biffer pH值 沒差!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.100.165
推 pacity:我還看過有電泳的說明書特別提醒不要調pH 140.129.74.200 01/20
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 computerdns.bbs@bbs.ym.edu.tw (天上飛的狗), 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGEy
時間 陽明大學神農坡資訊站 (Thu Jan 20 22:35:57 2005)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
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※ 引述《haime (一片混沌)》之銘言：
> ※ 引述《aggaci.bbs@ptt.cc (五子棋啦)》之銘言：
> > 我也沒調過
> > 跑出來非常的好看!
> > 所以我覺得running biffer pH值 沒差!
> 印象中running buffer的pH應該是不用調的
對啊~好像不需要調
--
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※ Origin: 陽明神農坡 <bbs.ym.edu.tw> ◆ From: 210.85.163.203
> --------------------------------------------------------------------------- <
作者 ANUS.bbs@bbs.badcow.com.tw (我也要放寒假 Orz), 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGEy
時間 不良牛牧場 (Thu Jan 20 22:52:48 2005)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
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會不會是APS泡錯%數
o.o?
※ 引述《computerdns.bbs@bbs.ym.edu.tw (天上飛的狗)》之銘言：
: ※ 引述《haime (一片混沌)》之銘言：
: > 印象中running buffer的pH應該是不用調的
: 對啊~好像不需要調
--
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作者 aggaci (五子棋啦) 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGEy
時間 Fri Jan 21 02:11:50 2005
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※ 引述《ANUS.bbs@bbs.badcow.com.tw (我也要放寒假 Orz)》之銘言：
: 會不會是APS泡錯%數
: o.o?
: ※ 引述《computerdns.bbs@bbs.ym.edu.tw (天上飛的狗)》之銘言：
: : 對啊~好像不需要調
反正所有配PAGE的buffer全換!
不要浪費時間去找十麼地方出了問題!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.100.165
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作者 Ithilloth (Ithilloth) 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 Fri Jan 21 03:23:54 2005
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※ 引述《aggaci (五子棋啦)》之銘言：
: ※ 引述《ccdd.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (................)》之銘言：
: : running buffer的pH值要多少ㄋ
: : 我從來都沒有調過ㄝ
: : 可是跑到現在也沒有什麼問題
: 我也沒調過
: 跑出來非常的好看!
: 所以我覺得running biffer pH值 沒差!
PH8.3 molecular cloning的附錄上寫的
如果不調的話 我今天配出來是8.6 跟8.3也滿接近的啦
感覺跑的會比較久 電阻好像比較大 感覺啦 反正膠還是漂亮的跑完了
東西跑不下去應該是running buffer的問題
重新配個stock起來 10倍1L可以用很久
天氣冷記得泡的時候要加熱 不然SDS很難溶
不過東西跑不下去為什麼會是APS的問題?
APS潮解的話 膠就不會凝啦
只是好奇問問
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.62.93.95
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作者 ROKEE.bbs@bbs.badcow.com.tw (死胖子超怕熱), 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 不良牛牧場 (Fri Jan 21 19:32:14 2005)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
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※ 引述《GINPAY.bbs@ptt.cc ()》之銘言：
: 最近跑SDS PAGE
: 頑固的sample 死也不stacking
: 按照molecular cloing 上配方
: 1.0M Tris(pH6.8) 已經確認過了 還是沒辦法
: 每個well sample diffuse成一團進入 seperating gel
: 請問還有什麼地方我沒注意到的?
你要不要看一下你們跑PAGE架子的白金絲是不是斷了....
如果是biorad系統的話我們這兒就遇到過... -_-
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作者 duse.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (機), 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 夢之大地 (Sun Jan 23 01:03:52 2005)
轉信 ptt!Group.NCTU!grouppost
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sample buffer下重一點試試
※ 引述《aggaci.bbs@ptt.cc (五子棋啦)》之銘言：
> ※ 引述《ccdd.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (................)》之銘言：
> : running buffer的pH值要多少ㄋ
> : 我從來都沒有調過ㄝ
> : 可是跑到現在也沒有什麼問題
> 我也沒調過
> 跑出來非常的好看!
> 所以我覺得running biffer pH值 沒差!
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※ Origin: <bbs.ccns.ncku.edu.tw> ◆ From: 218-167-13-151.dynamic.hinet.net
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作者 jellies (小僑兒 看板 Biotech
標題 Re: SDS-PAGE
時間 Sun Jan 30 15:22:26 2005
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※ 引述《duse.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (機)》之銘言：
: sample buffer下重一點試試
: ※ 引述《aggaci.bbs@ptt.cc (五子棋啦)》之銘言：
: > 我也沒調過
: > 跑出來非常的好看!
: > 所以我覺得running biffer pH值 沒差!
可以檢查一下SDS是否有問題...
之前我們有遇過是loading buffer裡忘了加SDS
running buffer裡的SDS也沒加....
連maker都跑不下來.....
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.124.50.28
推 Ithilloth:native還是會跑下來喔! 140.109.55.57 01/30
推 Ithilloth:不加sds是電泳的另一種做法 140.109.55.57 01/30