最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑
厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人,
原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以
想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一
樣不會裂。
感恩阿~ GOOD LUCK
--
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◆ From: 140.113.173.151
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發信人: nobody.bbs@ptt3.cc (Nobody's here.), 看板: Biotech
標 題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎?
發信站: 批踢踢參 (Mon Apr 25 23:30:44 2005)
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※ 引述《paraheamly.bbs@ptt.cc (一了百了 是我現在的心情)》之銘言:
: 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑
: 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人,
: 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以
: 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一
: 樣不會裂。
: 感恩阿~ GOOD LUCK
我都用最笨的方法....
全部都泡在水裡面封膠 封好再拿出來 絕對不會有氣泡
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◆ From: 140.109.4.130
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作者: paraheamly (一了百了 是我現在的心情) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎?
時間: Mon Apr 25 23:58:20 2005
※ 引述《nobody.bbs@ptt3.cc (Nobody's here.)》之銘言:
: ※ 引述《paraheamly.bbs@ptt.cc (一了百了 是我現在的心情)》之銘言:
: : 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑
: : 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人,
: : 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以
: : 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一
: : 樣不會裂。
: : 感恩阿~ GOOD LUCK
: 我都用最笨的方法....
: 全部都泡在水裡面封膠 封好再拿出來 絕對不會有氣泡
^^^^^^^^^^^^^^
想請問一下,因為這方法我試過,可是我是用透明玻璃紙,全部泡在水中,
就都散了,拿起來的時候就有氣泡,不知道你是用何種方式讓他不散掉
感謝~~
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◆ From: 140.113.185.182
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作者: hjhao (BIO) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎?
時間: Tue Apr 26 18:13:05 2005
※ 引述《paraheamly (一了百了 是我現在的心情)》之銘言:
: 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑
: 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人,
: 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以
: 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一
: 樣不會裂。
: 感恩阿~ GOOD LUCK
如果目的只是在保存data, 而非後續還有其他用途的話,
要不要考慮找一台gel dryer,
據說, 乾的好的話, 染過色的膠會變得很漂亮.
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◆ From: 210.66.6.19
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作者: lofishive (化學與人生) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎?
時間: Tue Apr 26 20:00:20 2005
※ 引述《paraheamly (一了百了 是我現在的心情)》之銘言:
: ※ 引述《nobody.bbs@ptt3.cc (Nobody's here.)》之銘言:
: : 我都用最笨的方法....
: : 全部都泡在水裡面封膠 封好再拿出來 絕對不會有氣泡
: ^^^^^^^^^^^^^^
: 想請問一下,因為這方法我試過,可是我是用透明玻璃紙,全部泡在水中,
: 就都散了,拿起來的時候就有氣泡,不知道你是用何種方式讓他不散掉
: 感謝~~
我的方法
材料: 一片玻璃或任何可支撐板都可以 但要透明的
你的PAGE
兩張玻璃紙
方法: 玻璃板先以水rinse 一張玻璃紙先蓋在玻璃片上
儘可能平坦 並且去掉氣泡(可以用推的推到邊緣 到界面處
氣泡自然會破掉)
這層玻璃紙上在覆上水 反正就是維持濕潤
放上你的PAGE 一定不可以有氣泡喔
我以前是用鑷子 但是不要夾 我是用鑷子屁股扁平端撐起
PAGE 再放在那層濕潤的玻璃紙上
再來最關鍵也最高難度 第二張玻璃紙先以水潤濕
蓋在PAGE上 這時當然很容易有氣泡
但是我都用水滴把汽泡的地方趕掉 任何一個小汽泡都不行喔
你也可以用推的 但是我覺得還是水好用
把玻璃紙粘起來 因為是濕的所以可以
試試看吧 我封到後來PAGE都不會裂
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我的理想狀態︰
把自己逼到絕處 然後再強迫逢生!
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◆ From: 218.175.217.129
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作者: henrywang (hw) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎?
時間: Tue May 3 17:24:54 2005
憑運氣吧!我通常會先把膠scan到電腦裡再去封膠,所以破了也沒關係。
※ 引述《paraheamly (一了百了 是我現在的心情)》之銘言:
: 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑
: 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人,
: 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以
: 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一
: 樣不會裂。
: 感恩阿~ GOOD LUCK
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