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最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人, 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一 樣不會裂。 感恩阿~ GOOD LUCK -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.173.151 > -------------------------------------------------------------------------- < 發信人: nobody.bbs@ptt3.cc (Nobody's here.), 看板: Biotech 標 題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎? 發信站: 批踢踢參 (Mon Apr 25 23:30:44 2005) 轉信站: ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!ptt3 ※ 引述《paraheamly.bbs@ptt.cc (一了百了 是我現在的心情)》之銘言: : 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑 : 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人, : 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以 : 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一 : 樣不會裂。 : 感恩阿~ GOOD LUCK 我都用最笨的方法.... 全部都泡在水裡面封膠 封好再拿出來 絕對不會有氣泡 -- ※ 發信站: 批踢踢參(ptt3.cc) ◆ From: 140.109.4.130 > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: paraheamly (一了百了 是我現在的心情) 看板: Biotech 標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎? 時間: Mon Apr 25 23:58:20 2005 ※ 引述《nobody.bbs@ptt3.cc (Nobody's here.)》之銘言: : ※ 引述《paraheamly.bbs@ptt.cc (一了百了 是我現在的心情)》之銘言: : : 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑 : : 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人, : : 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以 : : 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一 : : 樣不會裂。 : : 感恩阿~ GOOD LUCK : 我都用最笨的方法.... : 全部都泡在水裡面封膠 封好再拿出來 絕對不會有氣泡 ^^^^^^^^^^^^^^ 想請問一下,因為這方法我試過,可是我是用透明玻璃紙,全部泡在水中, 就都散了,拿起來的時候就有氣泡,不知道你是用何種方式讓他不散掉 感謝~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.185.182 > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: hjhao (BIO) 看板: Biotech 標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎? 時間: Tue Apr 26 18:13:05 2005 ※ 引述《paraheamly (一了百了 是我現在的心情)》之銘言: : 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑 : 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人, : 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以 : 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一 : 樣不會裂。 : 感恩阿~ GOOD LUCK 如果目的只是在保存data, 而非後續還有其他用途的話, 要不要考慮找一台gel dryer, 據說, 乾的好的話, 染過色的膠會變得很漂亮. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.66.6.19 > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: lofishive (化學與人生) 看板: Biotech 標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎? 時間: Tue Apr 26 20:00:20 2005 ※ 引述《paraheamly (一了百了 是我現在的心情)》之銘言: : ※ 引述《nobody.bbs@ptt3.cc (Nobody's here.)》之銘言: : : 我都用最笨的方法.... : : 全部都泡在水裡面封膠 封好再拿出來 絕對不會有氣泡 : ^^^^^^^^^^^^^^ : 想請問一下,因為這方法我試過,可是我是用透明玻璃紙,全部泡在水中, : 就都散了,拿起來的時候就有氣泡,不知道你是用何種方式讓他不散掉 : 感謝~~ 我的方法 材料: 一片玻璃或任何可支撐板都可以 但要透明的 你的PAGE 兩張玻璃紙 方法: 玻璃板先以水rinse 一張玻璃紙先蓋在玻璃片上 儘可能平坦 並且去掉氣泡(可以用推的推到邊緣 到界面處 氣泡自然會破掉) 這層玻璃紙上在覆上水 反正就是維持濕潤 放上你的PAGE 一定不可以有氣泡喔 我以前是用鑷子 但是不要夾 我是用鑷子屁股扁平端撐起 PAGE 再放在那層濕潤的玻璃紙上 再來最關鍵也最高難度 第二張玻璃紙先以水潤濕 蓋在PAGE上 這時當然很容易有氣泡 但是我都用水滴把汽泡的地方趕掉 任何一個小汽泡都不行喔 你也可以用推的 但是我覺得還是水好用        把玻璃紙粘起來  因為是濕的所以可以           試試看吧  我封到後來PAGE都不會裂         -- 我的理想狀態︰ 把自己逼到絕處 然後再強迫逢生! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.175.217.129 > -------------------------------------------------------------------------- < 作者: henrywang (hw) 看板: Biotech 標題: Re: [問題] 有人封過SDS-PAGE的厚膠嗎? 時間: Tue May 3 17:24:54 2005 憑運氣吧!我通常會先把膠scan到電腦裡再去封膠,所以破了也沒關係。 ※ 引述《paraheamly (一了百了 是我現在的心情)》之銘言: : 最近一直在做跑PAGE,由於表現的protein少,所以要用安法馬西亞的厚膠跑 : 厚約1.5mm,有跑出結果,可是在封膠的過程中,一直給他裂,請教過不少人, : 原因大多都是有氣泡造成的結果,可是做了幾次已經很小心了,還是會裂,所以 : 想問問版上封膠的高手大大們,有何好方法,可以讓厚膠封的跟0.75mm的薄膠一 : 樣不會裂。 : 感恩阿~ GOOD LUCK -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.72.137