推 icome:OK!我試試看 感謝! 09/03 10:37
推 countonme:其實lipofectamine2000說明書上是建議九分滿 09/03 20:49
恕刪 我覺得你293T seeding的太少 ㄧ般我都是70%在做 無論是細胞的狀況
或是後續virus titer都會好很多
: 我是用lipofectamine 2000來做293T的transfection，
: 並非使用建議的TransIT-LT1。
用哪個都可以 不過建議lipofectamine 2000 對293T不要超過3-4小時 毒性比較少
我沒做過6小時 不過3小時OK 而且效率跟LT1 OVERNIGHT 差不多
: DNA total 5ug, lipofectamine 10ul，使用OPTI-MEM，約6小時後換medium
: 做完隔天看細胞都還平安無事
: 到第三天準備收virus時發現細胞已經死了好多...
: 請問這是正常的嗎?還是因為liposome加了太多才死掉的?
不會太多 應該不是LIPOSOME的關係 DNA可以再多一點 效率會更好
基本上只要是liposome transfection 都可以 我想你用2000是很ok的
之後titer也不錯
你可以試試看短點的時間和細胞的數目增加看看
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