→ chemsp:basaline一定要穩定達到一直線吧 這樣實驗data才有可信度吧 12/07 22:17
推 StillRick:1. wash多幾次，確定column無雜質 12/07 23:07
推 StillRick:2. 用極性更高或更低的solvent洗，一樣是洗去雜質 12/07 23:12
推 apa9394:新手上路...再給點耐心吧.. 12/09 11:54
推 royta:HPLC的ACN buffer放太久也會造成baseline不穩...試試重配 12/27 12:51
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作者: zovaca (吃屎吧你～～) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] HPLC basaline 不穩定是為什麼呢
時間: Fri Dec 9 23:10:56 2005
※ 引述《chemsp (......)》之銘言：
: 實驗前檢查一下column有無鬆掉而導致壓力不穩
壓力不穩也有可能是因為墊片的毀損..
或是裡面結構上的損耗..
: 這些因素都有可能影響到basaline的準確性
: 不然就是熱機20min後平衡個兩三次
我有時候都會熱機平衡30分鐘以上..
不過每次使用完畢的清洗也是很重要的保養動作吧..
: 直到數值穩定些在開始run data
: ※ 引述《paraheamly (涼爽的天氣 悠閒的心情)》之銘言：
: : 最近用HPLC再做胺機酸的分離，雖然氨基酸都有分離出來，但卻basaline卻高高低低
: : 並非接近平穩的一條線，老闆因為這樣一直不相信我的數據，想請問版上的高手大大，
: : 這是什麼原因，有什麼方法可以改善這樣的問題，謝謝
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◆ From: 134.208.24.43
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作者: TauriCrab (日出時分) 看板: Biotech
標題: Re: [問題] HPLC basaline 不穩定是為什麼呢
時間: Wed Dec 14 21:26:45 2005
※ 引述《zovaca (吃屎吧你～～)》之銘言：
: ※ 引述《chemsp (......)》之銘言：
: : 實驗前檢查一下column有無鬆掉而導致壓力不穩
: 壓力不穩也有可能是因為墊片的毀損..
: 或是裡面結構上的損耗..
如果有跑酸buffer
在每次跑完都要用水與有機相分別清洗一段時間才能關機
旨在洗去幫浦與管柱中的殘留鹽
另外跑鹽也會讓幫浦內的墊片快速老化 1~3個月就要更新
LC操作手冊很多人操作一輩子都沒看過 但是裡面寫得都很清楚～
: : 這些因素都有可能影響到basaline的準確性
: : 不然就是熱機20min後平衡個兩三次
: 我有時候都會熱機平衡30分鐘以上..
: 不過每次使用完畢的清洗也是很重要的保養動作吧..
: : 直到數值穩定些在開始run data
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