※ [本文轉錄自 Biotech 看板]
作者: cws15 (globe trekker  NI 看板: Biotech
標題: Re: 究竟EtBr有多可怕?
時間: Mon Jul 18 23:27:21 2005
※ 引述《NEJM.bbs@bbs.ccns.ncku.edu.tw (我想睡覺)》之銘言:
: 常聽到人家說EtBr會咬住DNA,會致癌。作染色的時候一定要戴手套。所有碰過EtBr的
: 東西都不可以再用了。
: 可是也有聽人家說,EtBr會光解,所以除了染色的那一盆跟膠片之外,其他的其實赤手
: 碰到也沒有關係。也有人說用酒精噴一噴擦一擦就會好。
: 究竟事實是怎樣,作實驗安全防護又要到什麼樣子的階段?
: 有人可以清楚的說明嗎?謝謝:)
溴乙烯 (Ethidium Bromide, EtBr) 之安全操作
嘉義大學 分子與生物化學系暨生物科技研究所
廖慧芬 老師 提供
溴乙烯 (Ethidium bromide, EtBr) 可嵌入去氧核醣核酸或核醣核酸的螺旋體結構中,在紫外光下呈現橘紅色螢光之化學物質。普遍應用於分子生物學實驗,作為核酸之染劑。由於它會與核酸結合,影響細胞內核酸複製的過程,甚至導致癌症的發生,被認定是一種有毒性之致癌物質或突變劑。因此,瞭解其正確的操作方法,方能保護自身與環境的安全。
1. 特性
(1) EtBr呈深紅色之結晶,視實驗之需要,亦可買到液態之EtBr溶液。
(2) EtBr 屬於一種致突變劑,可能會造成癌症或畸胎。
(3) EtBr 有毒,可能會刺激上呼吸道、眼睛、與皮膚,產生不適。
(4) 不當的操作時,EtBr 可能會經由小腸吸收、皮膚接觸、與呼吸等,進入人體內。
2. 交互作用
现 EtBr 與強力氧化劑 (strong oxidizing agent) 不相容。
3. 操作時應注意事項
(1) 避免直接接觸。
(2) 盡可能使用液態的EtBr溶液。若使用粉末狀的EtBr,操作時應避免粉塵揚起而吸入體內。
(3) 實驗室中歸劃一個專區來處理所有與EtBr 相關之操作,並特別標示警語。
(4) 此EtBr專區之實驗桌需鋪上抗污紙,且ㄧ旦發現污染應立即更換。
(5) 此EtBr專區之器具,如: pipettes、水盆、刀片、簽字筆…等,需獨立一套於此區專用,並且不與其他實驗混用。
(6) 操作時務必穿上實驗衣,並且戴上橡皮手套,以避免與皮膚接觸。若需碰觸門把、離心機、標籤紙、電話…等,先脫下手套,再進行其他工作。(建議:ㄧ隻手戴上手套來操作EtBr,另ㄧ隻手不戴手套可做開門、寫字、與操作儀器等事情)
(7) 懷孕婦女務必先熟悉EtBr之一切安全操作方法。
(8) 所有的實驗室夥伴均應明瞭EtBr之操作規則。
4. 廢液處理
(1) EtBr廢液之處理,應遵照相關之實驗室廢棄物處理法來辦理。
(2) 已有販售處理EtBr廢液的產品,可視需要購買使用。
(3) 提供一個便宜的方法,步驟如下:
a. 加水將EtBr濃度稀釋至 < 0.5 mg/ml。
b. 加入等體積的KMnO4溶液 (0.5 M)混合。再加入等體積的HCl溶液 (2.5 N),混合,室溫下靜置數小時 (~ over night)。
c. 加入等體積的NaOH溶液 (2.5 N),混合後即可倒入水槽。
(4) 其他清除EtBr的方法可參考:
a. Lunn G, Sansone E. Analytical Biochemistry. 162: 453-458. 1987.
b. http://www.schleicher-schuell.com/bioscience
5. 不慎污染EtBr時之處理
(1) 移除抗污紙,用肥皂水清洗污染之桌面或地板。
(2) 若實驗器具污染了EtBr,可調製下列的溶液來擦拭。(擦拭時記得戴上手套)
50% H3PO2 20 ml
NaNO2 4.2 g in 300 ml H2O
(3) 可利用紫外線 (UV) 照射來檢視污染區域是否已經清除乾淨。(注意:少量的EtBr可能不易偵測得到)
6. 不慎接觸EtBr時之緊急處理
(1) 眼睛或皮膚若不慎接觸時,至自來水下沖洗15分鐘以上。
(2) 若身體不適,立刻就醫。
7. 其他可能之危險性
贯 核酸經EtBr染色後,利用紫外線來觀察核酸的位置,此時眼睛與皮膚需做適當之防護,以避免紫外線之傷害。
贯 其他相關資料,請參考:http://www.chem.kuleuven.ac.be/safety/proc15.htm
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.227.79
--
生與死,起源與終點,生命的意義為何,從哪裡來,往哪裡去
是相信有一位造物主需要的信心大,還是相信一切事物原本就理所當然地存在需要的大
信就是所望之事的實底,未見之事的確據;然而我們不過都是憑著信心,無知地活著
每個人都會死,但是很少人願意認真地把它當一回事,總認為它還離我們很遠
如果死後有神的審判,那麼很多人都要傷腦筋了;如果沒有,身為基督徒倒也不吃虧
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.169.220.114