推 ArethusaKo:your solvent system had something trouble? 10/24 20:27
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作者: tgxs (米蟲) 看板: Chemistry
標題: Re: 請問 HPLC 問題
時間: Tue Oct 24 09:57:20 2006
※ 引述《THK ( NN NN)》之銘言：
: 請問一下各位專業的板友們
: 我最近再打HPLC實驗
: 樣品為PABA
: 利用Ion-pair mobile phase 來跑
: 管柱ODS RP
: 前幾天跑都還好好的
: 但昨天跟今天跑 完全變了樣
: 原本應該出現PEAK的地方 還是有PEAK
: 但PEAK到達MAX(500mv)之後 就會迅速往下掉 一直掉到負(-2000mv)的地方
: 然後才又回到MAX(500mv) 之後回到BASELINE
: 看起來就像PEAK活生生被剖成兩半 而且這一刀還真大刀 一刀砍到負的去
: ________________________A A________________________________
: ∣∣胬
: V
: 看起來大概是這樣 只是負的地方更下去
: 請問這有可能是啥問題阿
: 我問老師 他說他做20年也沒看過這樣的
: 請問版友有人遇過的嗎
你的情況沒有說的很清楚，所以我只能猜測：
1. 如果你的樣品濃度不高，就可能會看到這種情況，此情況應該為溶劑的影響
相對的你的樣品濃度高的話，這個訊號就會變很小，除非你放大來看，否則不會看到。
建議你打空白的進去看看情況是否一樣。
2. 溶劑的影響，我不確定你用的溶劑是哪種。例如THF，有種THF會添加BHT當穩定劑
當你打進去的sample溶劑與mobile phase比例不對時就會有這種情況發生，建議THF
購買時認明不含BHT。
3. 你的detector是哪種。如果是UV sensor應該較不易發生這種情況，另一種RI(如果沒
記錯的話)，它對溫度較敏感，使用時要注意。
4. 你的column被污染了。可以試著把pre column或是column更換新的。
這應該是主要原因，如果還不行建議找廠商來修。
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.96.14.189
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作者: puh1005 (噗!) 看板: Chemistry
標題: Re: 請問 HPLC 問題
時間: Tue Oct 24 10:51:58 2006
原po所描述的很大可能是積分訊號的問題
either是detector在baseline沒有平衡的很好
例如autozero跑掉了,gradient沒有平衡回來都會導致baseline偏移
或是訊號線鬆脫,短路之類的
此外尤其是若分析的東西沒有洗乾淨
卡在detector的flow cell中間也可能導致baseline跑掉
這些是很常見的
應該先排除這類的問題
※ 引述《tgxs (米蟲)》之銘言：
: ※ 引述《THK ( NN NN)》之銘言：
: : 請問一下各位專業的板友們
: : 我最近再打HPLC實驗
: : 樣品為PABA
: : 利用Ion-pair mobile phase 來跑
: : 管柱ODS RP
: : 前幾天跑都還好好的
: : 但昨天跟今天跑 完全變了樣
: : 原本應該出現PEAK的地方 還是有PEAK
: : 但PEAK到達MAX(500mv)之後 就會迅速往下掉 一直掉到負(-2000mv)的地方
: : 然後才又回到MAX(500mv) 之後回到BASELINE
: : 看起來就像PEAK活生生被剖成兩半 而且這一刀還真大刀 一刀砍到負的去
: : ________________________A A________________________________
: : ∣∣胬
: : V
: : 看起來大概是這樣 只是負的地方更下去
: : 請問這有可能是啥問題阿
: : 我問老師 他說他做20年也沒看過這樣的
: : 請問版友有人遇過的嗎
: 你的情況沒有說的很清楚，所以我只能猜測：
: 1. 如果你的樣品濃度不高，就可能會看到這種情況，此情況應該為溶劑的影響
: 相對的你的樣品濃度高的話，這個訊號就會變很小，除非你放大來看，否則不會看到。
: 建議你打空白的進去看看情況是否一樣。
: 2. 溶劑的影響，我不確定你用的溶劑是哪種。例如THF，有種THF會添加BHT當穩定劑
: 當你打進去的sample溶劑與mobile phase比例不對時就會有這種情況發生，建議THF
: 購買時認明不含BHT。
: 3. 你的detector是哪種。如果是UV sensor應該較不易發生這種情況，另一種RI(如果沒
: 記錯的話)，它對溫度較敏感，使用時要注意。
: 4. 你的column被污染了。可以試著把pre column或是column更換新的。
: 這應該是主要原因，如果還不行建議找廠商來修。
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