實驗室08/25
第一天進實驗室，大致了解一下實驗室主要再做的東西(CA-MRSA)，然後就讓我們接菌，
看見疊成一疊、一個一個的plate裡面都是金黃色葡萄球菌感覺還蠻奇妙的。
實驗的全程都是在無菌空間操作，先點上酒精燈，然後把金屬製的loop放在上面燒，
(要從比較上面的地方燒到尾端，然後把尾端的那一小圈燒紅)
燒好之後放在Agar上面讓他冷卻一下，然後用loop取一點點第三區的菌
(第三區的菌是最後塗上去的，通常會有分出來一顆一顆的樣子，比較純也比較好取)
放在新的Agar上輕輕的來回塗，要注意不要太用力把Agar一起刮掉，
最後再把loop放在酒精燈上燒一燒，就可以把接好的菌放進去養(XD)
後來才發現裡面應該是維持在37度，然後有提供二氧化碳等等適合養菌的環境。
(加二氧化碳菌會養比較好)接菌完成之後要等24~30個小時才是最適合做實驗的時間。
今天就做了這樣而已，因為助理下午有事情所以我們下午就是去圖書館查paper
(結果還是辜狗大神查paper最快啊......學校的還是不知道怎麼用)
我總共印了四份paper下來，然後借了書回來看，至少了解一下S. aureus。
實驗室08/26 [前半]
今天先教我們做Agar，簡單來說1L的水是加上23g的Nutrient Agarose(簡稱NA)
[NB我忘了是什麼的縮寫了，好像是配測定MRSA的膠用的]
助理有說不要加太滿怕滅菌的時候會跑出來，所以我們今天500ml的只加到400ml而已，
然後用電子天平量了9.2g的NA加下去之後把他蓋上，放在攪拌加熱器上Stir，
(裡面原本就有放攪拌棒了)再稍微搖一搖之後就拿去滅菌。
昨天有先帶我們看過滅菌的流程，在容器瓶口處用一點鋁箔紙包起來，
然後不要轉緊(怕會爆開)，貼上滅菌膠帶之後再拿去滅，
他要在1.5atm下維持121度15分鐘，升溫降溫其實就要等一段時間了，
所以下午才倒Agar，早上先把他先做到拿去滅菌的這一步。
再來看了我們昨天接的菌，不知道是不是因為第一次接的關係，
忽然有一種想要對他說「哈囉你是我接的金黃色葡萄球菌，請多指教」的感覺......
然後助理就教我們怎麼鑑定他是不是金黃色葡萄球菌(應該是乳膠凝集吧)，
用的試劑是滴出來是乳白色的Latex(雖然沒有確定他的實際名稱)
(*註：參閱實用臨床微生物診斷學--
可利用Staphylase, Staphytect plus, Staph latex試劑或PBP2' test試劑
操作乳膠凝集試驗，若兩分鐘內有凝集反應，就為S. aureus
乳膠試劑可測定S. aureus之凝固因子和蛋白質A，可同時測定兩種特性。
如果是測ORSA則以Staphytect plus比較好。)
把一小滴latex滴在廠商附贈的黑色塑膠板上，然後取一點菌，把他和latex混合，
通常混沒有多久就會看見明顯的凝集反應了(上面就會一粒一粒的，過越久越多)
後來還示範了另外一種方法是滴兩種藍色的試劑(助理說一罐是陽性一罐是陰性)
其中一個滴在上面把菌放上去會有藍色顆粒出現，另一個則沒有，
要兩個同時成立才可以說那是S. aureus。不過那個試劑廠商附的就不是黑色塑膠片了，
方便起見只用旁邊的白圈圈讓我們看反應，還蠻明顯的。
下一個就是要把菌拿去儲存囉，要把他存在零下七十度的冰箱裡面......
用裝一堆小珠珠和一點液體的小瓶子儲存，那樣一盒五十罐就要$2500呢，
放小珠珠的意義據說是可以讓菌長在裡面，然後在液體用完的時候可以拿loop去挑，
然後從中間的小洞戳一戳就可以再找出一些菌出來，雖然我很懷疑這樣的實用性...
(畢竟只要吸一點點液體出來就已經有菌了呀不是嗎)
然後把plate上面的菌大部分都用loop刮下來放進去攪一攪搖一搖讓他混合均勻，
寫上編號還有年代(因為可能一放就是好幾年)，就可以拿去冰了。
大冰箱在院長實驗室的對面，還用鑰匙鎖起來以防裡面的細菌被偷，
(編按：感覺上裡面冰的細菌比冰箱還要有價值呢......)
有看見裡面還有放了92年應該是肺炎鏈球菌的，看來真的能放很久@@
助理說肺炎鏈球菌撐的時間也差不多幾年而已，S. aureus可以撐的更久，
然後上面還冰了一些病毒，據說保麗龍蓋開久一些他就會死翹翹的樣子，
看來病毒和細菌的確是很貴重的東西啊(筆記)
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打到這已經覺得好累 還有MRSA的測定沒寫Orz
先去煮麵來吃了，待會還要精神戰力周看莒光課。
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