※ 引述《shindohikaru (我要I for you)》之銘言:
: ※ 引述《Dannywalker (freshman)》之銘言:
: : 大助教上次是不是有要我們找這些東西的資料呀
: : 請問有誰有找到嗎
: : 還有普生實會怎麼考呀
: : 會考實驗步驟嗎
: X-gal 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside
: 5-溴-4-氯-3-(口引) (口朵)-β-D-半乳糖甘ꌊ: 細菌質體中,含有一基因--laz,它能形成B-galactosidase(B-半乳糖甘脢)
: ,而B-galactosidase和X-gal(一化學物質)反應會生成藍色。
: 將gene of interest 嵌入切開的laz之間使DNA重組,若重組不成功,
: 則laz基因又會接回去,將帶有此種重組不成功之質體的細菌,
: 置於含有X-gal的培養基中培養,laz產生作用,便會呈現藍色
: 。若重組成功,laz因被分開而不作用,將帶有此種重組成功之
: 質體的細菌,置於含有X-gal的培養基中培養,便不會呈現藍色。
: IPTG isopropyl-b-d-thiogalactopyranoside
: 異丙基硫代半乳糖甘
: 簡單的說 就是表現外嵌基因的一種inducer 使 lac operon表現出外源蛋白
以上的說法很正確
但在真正實驗中 常出現要藍不藍要白不白的菌點
而且就算去挑白色點去養
也不見的是你要的菌 因為ligation transformation的步驟常常會亂接
因此真正在挑的時候
常常一個重組基因要挑個2星期 甚至各把月
這種篩選方式 並不如想像中好用....
我就是深受其害的研究生
--
小舞愛說話
http://mypaper.pchome.com.tw/news.php/tracy15/
歡迎參觀 ^^
給我點加油鼓勵吧!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.98.224