課程名稱︰生物技術核心實驗
課程性質︰實驗
課程教師︰杜宜殷
開課系所︰生技學程
考試時間︰考古題
試題 : DNA
1.請問本實驗中marker DNA之追蹤染劑中所含兩種染劑的名稱及其於1﹪agarose gel
中泳動速率相當的DNA大小
2.請寫出沉澱DNA及去除DNA沉澱鹽分的方法
3.試說明下列蛋白質表現載體的啟動子統系統(promoter system)
a. pBluescript SK(－)
b. pET vectors
c. pQE vectors
d. pUC vectors
e. pGEX vectors
4.試說明下列遺傳標籤(genetic marker)
a. lacZ
b. lacZ’
c. lacI
d. lacIq
5.試說明下列與pBluescript SK(－)載體相關問題
a. 本課程所使用的菌株為何
b. 進行blue white selection 時，所使用得substrate為何
c. 進行blue white selection 時，所使用得inducer為何
d. 請圖示並寫出細菌生長曲線的各個階段
6.進行核酸雜交時常(nucleic acid hybridization)，下列因子對於Tm的影響為何
a. base composition
b. duplex length
c. Na+ concentration
d. Formamide concentration
e. DNA concentration
7.以分光光度計測定下列不同種類核酸時，其濃度為何
a. 雙股DNA=A260* ?? μg/mL
b. 單股RNA=A260* ?? μg/mL
c. 單股DNA=A260* ?? μg/mL
8.試舉一限制酶說命名原則
9.請問使用分光光度計時，測量細菌或是DNA溶液的光源或是波長為何?
10.pBlueGus 切下Gus (1807 bp) 後，與pQE31 (3464 bp) 用限制鋂切割後，再做ligate
的產物為何只有 5235 bp？以Bam HI, Hind III切割後的DNA末端是5端突出還是3端突
11.出或是blunt end? pQG-11與pBlueGus的 copy number之比較為何?
12.抽取質體DNA時，SDS, NaOH, potassium acetate, PCI的作用為何?
13.試解釋EtBr的作用與原理?
14.製作勝任細胞時，所使用的化學藥品為何? Heat shock的溫度為何?
15.SD sequence中以哪些序列較多? (AU, GC …?) Open reading frame的定義為何?
16.pQG載體中，promotor的啟動機制為何? 請就repressor, operator, glucose來解釋。IPTG
及X-Gluc的作用為何? 藍白挑選時的藍色菌落形成原因為何?
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