基因操作一詞是指：把外來基因經重組後導入宿主細胞中，則可表現並生產此基因的
有用產物。
由於所欲利用其表現的基因本身並不具有複製起始，不能自動生產蛋白質，因此我們
將來自不同生物的DNA利用可切割特定DNA序列的核酸內切?
(restriction endonucleases)切割開，再以可連接帶有相同核酸黏合端序列之不同來源
、大小之DNA片段的接合酵素(ligase)，將特殊DNA片段與經相同核酸內切?處理的載體
(vector)進行接合，形成重組的DNA，並將這重組DNA片段經基因轉型方式
(transformation )送入宿主細胞(host)中，經由宿主細胞不斷的分裂，而可持續的複製
這DNA片段。
選殖載體需具備有以下的條件：
1.單一核酸內切?目標位置
2.一個或一個以上可選擇之遺傳標識
3.具複製起始
因為目的序列與載體DNA正確連接的效率、重組導入細胞的效率不是百分之百，而使最後
生長繁殖出來的細胞並非都帶有目的序列，因此基因操作的最後一步驟還須經過篩選
(dcreening)。篩選之方法如下：
1.根據重組載體的標誌作篩選：最常見的載體攜帶標誌是抗藥性，當培養基中含有抗生素
時，只有攜帶相應抗藥性基因載體的細胞才能生存繁殖。
2.免疫法︰將基因轉殖後的細胞稀釋培養成菌落後，複印到硝化纖維膜上(此時的一個菌
落可當作是單一菌細胞增長而成的)，再利用標記(例如放射性)的核酸探針與特化細胞
的DNA進行分子雜交，核酸探針結合在含有目的序列的菌落DNA上而不會被洗脫，則可
利用放射性自動顯影辨認出來。
3.核酸雜交法：利用特定抗體與目的基因表現產物特殊性結合的作用進行篩選。例如某
一細菌經選殖後能自形合成組胺酸而存活，而此細菌突變株之培養基中則必須供以組
胺酸，如果在不含有組胺酸之培養基中培養重組體，則存活者就是我們所要的品系。
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不知為何ㄇㄟˊ(酵素)這個字打出來會變成問號...
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