群別______組別______實驗日期________助教姓名__________
執筆人__________系級______學號________
同組者__________系級______學號________
一,實驗名稱:
利用質體DNA轉型(Transformation)大腸桿菌----使用氯化鈣的轉型方法
二,實驗目的:
將質體DNA送入大腸桿菌細胞內,利用菌體大量複製得到大量的質體DNA
三,實驗原理:
I.菌體的選擇:
實驗所使用的菌最好是處於對數期中,因為太後期的(遲緩期以後)菌活力不佳
,即使換了新的培養基和空間也要過一陣子才能適應,回復正常活力;而太早期的
菌雖然新鮮,但量太少.因此在實驗前適當時間取菌來重新培養,利用測OD的方式
估菌量而推算菌所屬的生長期.
II.勝任細胞的製備:
一般而言,細胞膜並不會讓外來DNA進入,因為對細胞而言,外來DNA等同於異物,進入
細胞可能會有不良影響,因此我們在進行轉型時,便必需先製備可容許外來DNA進入的
勝任細胞才行.這次使用的是氯化鈣溶液,
四,材料:
五,實驗過程:
六,實驗結果:
七,結果分析:
八,討論及注意事項:
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.twbbs.org)
◆ From: b106.m5.ntu.edu.tw
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