群別____組別____實驗日期______助教姓名______
執筆人______系級____學號______同組者______系級____
學號______
一,實驗名稱:親和力膠體管柱層析
二,實驗目的:學習親和力膠體管柱層析的原理並熟悉操作
方法,同時收集實驗三,四所使用的材料.
三,實驗過程:
I.膠體製備:膠體回溫-->搖成懸浮狀後吸2ml到50ml小
燒杯-->加10ml PBS-->沉降後吸去上層溶
液-->再加10ml PBS重複上步驟-->加入約
5ml PBS.
II.流量校正:記錄空量筒重-->於管柱加入蒸餾水-->以
量筒承接二十滴後秤重-->計算管柱中流
出平均每滴之量.
III.管柱裝填:架設管柱-->用一些PBS充滿管柱底部開關
至黃色塑膠的部份-->倒入膠體懸浮液-->
打開開關控制流速,待膠體沉降完成,關閉
開關.
IV.平衡:測量所使用的PBS之pH值-->以PBS沖洗管
柱-->檢測沖洗液pH值-->重複步驟直到進
出管柱的PBS所測pH值相同.
V.給予試料:停止管柱流速-->吸去膠體上方多餘之PBS
-->加生物試料溶液於膠體上-->打開流速
-->待生物材料快完全進入膠體時停止流
速-->稍浸泡一段時間-->沿管壁加入PBS
覆蓋-->連通管柱進行層析-->收集流出液
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